固定化酶（immobilized enzyme）是用物理的或化學的方法使酶與水不溶性大分子載體結合或把酶包埋在水不溶性凝膠或半透膜的微囊體中制成的。酶固定化后一般穩定性增加，易從反應系統中分離，且易于控制，能反復多次使用。便于運輸和貯存，有利于自動化生產。固定化酶是近十余年發展起來的酶應用技術，在工業生產、化學分析和醫藥等方面有誘人的應用前景。
包埋法
酶被裹在凝膠的細格子中或被半透性的聚合物膜包圍而成為格子型和微膠囊型兩種。包埋法制備固定化酶除包埋水溶性酶外還常包埋細胞，制成固定化細胞，例如可用明膠及戊二醛包埋具有青霉素酰化酶活力的菌體，可連續水解帤基青霉素，工業生產6-氨基青霉烷酸。
酶經過固定化后，比較能耐受溫度及pH的變化，最適pH往往稍有移位，對底物專一性沒有任何改變，實際使用效率提高幾十倍（如5′-磷酸二酯酶的工業應用）甚至幾百倍（如青霉素酰化酶的工業應用）。