.原理免疫學的基本反應是抗原-抗體反應。由于抗原抗體反應具有高度的特異性,所以當抗原抗體發生反應時,只要知道其中的一個因素,就可以查出另一個因素。免疫熒光技術就是將不影響抗原抗體活性的熒光色素標記在抗體(或抗原)上,與其相應的抗原(或抗體)結合后,在熒光顯微鏡下呈現一種特異性熒光反應。
直接法:將標記的特異性熒光抗體,直接加在抗原標本上,經一定的溫度和時間的染色,用水洗去未參加反應的多余熒光抗體,室溫下干燥后封片、鏡檢。
間接法:如檢查未知抗原,先用已知未標記的特異抗體(第一抗體)與抗原標本進行反應,用水洗去未反應的抗體,再用標記的抗抗體(第二抗體)與抗原標本反應,使之形成抗原—抗體—抗體復合物,再用水洗去未反應的標記抗體,干燥、封片后鏡檢。如果檢查未知抗體,則表明抗原標本是已知的,待檢血清為第一抗體,其它步驟的抗原檢查相同。
標記的抗抗體是抗球蛋白抗體,同于血清球蛋白有種的特異性,如免疫抗雞血清球蛋白只對雞的球蛋白發生反應,因此,制備標記抗體適用于雞任何抗原的診斷。
)熒光效率高,標記后下降不明顯。
3)熒光色澤與背景色澤對比鮮明。
4)標記后能保持生物學活性和免疫活性
5)標記方法簡單、快速。6)安全無毒
化學發光是利用化學反應產生的能量促使產生能級躍遷,從而發光,典型的如魯米諾檢測血跡;熒光是一種光致發光現象,必須提供光源去激發分子產生能級躍遷,進而發光。使用上述兩種方法進行免疫分析時,其區別很明顯,......
血液系統中的成體干細胞,是一個異質性的群體,具有長期自我更新的能力和分化成各類成熟血細胞的潛能。它是研究歷史最長且最為深入的一類成體干細胞。但是,你真的知道它的最初起源嗎?弗吉尼亞大學醫學院的腎臟研究......
2016年8月19日,國際著名遺傳學雜志《美國人類遺傳學雜志》(TheAmericanJournalofHumanGenetics)在線發表了復旦大學生命科學學院,遺傳工程國家重點實驗室及遺傳與發育協......
組織切片免疫熒光實驗步驟徐索文1.切片自然晾干2.復水5-10min3.PBS5min3次4.4%PFA4度固定30分鐘或者冷丙酮4度固定10分鐘5.PBS5min3次6.濾紙吸干,用免疫組化筆在切片......