(1)斜面培養基— 試管棉塞松緊要適度，不宜太松或太緊，棉塞深入試管內約 3cm 左右，并在表壓0.5MPa(1.5kg/cm2)下滅菌 1.5h，烘干備用。
(2)斜面培養基— 將瓊脂按配比量稱取，剪成細小段，用蒸餾水浸泡干凈，紗布過濾瀝干，置于燒杯中加適量蒸餾水，放在沸水鍋中煮沸溶解。
(3)斜面培養基— 配制培養基時，磷鹽、鎂鹽必須分別溶解，防止產生復合鹽沉淀，降低有效成份。
(4)斜面培養基— 用氫氧化鈉溶液調至 pH7.0~7.2，不能偏酸或過堿，否則不利于菌種生長。
(5)斜面培養基— 根據試管大小規格，一般裝入培養基量為試管體積的 1/4 左右。 每支試管棉塞部分最好用紙包扎。
(6)斜面培養基— 斜面培養基在 120°C滅菌 30min，不能使滅菌溫度太低或太高，前者滅菌不徹底，后者培養基破壞嚴重，不利于菌種生長。
(7)斜面培養基— 斜面培養基滅菌后，取出冷卻至 45°C左右攤成斜面。 待冷卻凝固后移于 37°C溫度下空白培養 48h，經仔細檢查確無雜菌后包扎備用(霉季可放冰箱保存)。