口服易被胃腸道消化酶破壞。皮下給藥吸收迅速，皮下注射后0.5～1小時開始生效，2～4小時作用達高峰，維持時間5～7小時；靜脈注射10～30分鐘起效，15～30分鐘達高峰，持續時間0.5～1小時。靜注的胰島素在血液循環中半衰期為5～10分鐘，皮下注射后半衰期為2小時。皮下注射后吸收很不規則，不同注射部位胰島素的吸收可有差別，腹壁吸收最快，上臂外側比股前外側吸收快；不同病人吸收差異很大，即使同一病人，不同時間也可能不同。胰島素吸收到血液循環后，只有5%與血漿蛋白結合，但可與胰島素抗體相結合，后者使胰島素作用時間延長。主要在腎與肝中代謝，少量由尿排出。