一、我們先來說說何為緩凍:
緩凍即為凍存細胞時,要程序降溫——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 過夜,次日投入液氮內。
二、那為什么要進行緩凍呢?
其實所謂的緩凍是一般使用傳統凍存液凍存過程中需要程序降溫。
傳統的凍存液,一般由胎牛血清、DMSO及基礎培養基等組分組成。凍存保護的DMSO組分,在進入細胞后結合細胞內部的水份,降低冰點,防止細胞在冷凍過程中形成冰晶對細胞造成損害。
但是DMSO只能在細胞內部保護細胞,細胞外部沒有保護,水結冰晶會在細胞膜外部受到損傷,為了防止冰晶過大,使用時必須采用程序降溫的方式,才可保證細胞復蘇的成功率(80%以上)。
若不采用程序降溫的形式,有些凍存的細胞,甚至復蘇成功率為0。
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| ECV304 | 人膀胱癌細胞(T24衍生物) |
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| NCI-H1975 | 人非小細胞肺腺癌細胞 |
| HK-2 | 人腎皮質近曲小管上皮細胞 |
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| A431 | 人皮膚鱗癌細胞 |
| MG63 | 人骨肉瘤細胞 |
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