• <td id="46i6g"><rt id="46i6g"></rt></td>
    <td id="46i6g"><kbd id="46i6g"></kbd></td>
  • <xmp id="46i6g"><option id="46i6g"></option><option id="46i6g"><option id="46i6g"></option></option>
  • <td id="46i6g"></td>
    發布時間:2021-11-29 11:41 原文鏈接: 分光光度(紫外吸收)法檢測DNA及RNA的純度及濃度

      1、預熱

      預熱紫外分光光度計10~20min。

      2、狹縫石英比色杯

      取兩只 1mL 的狹縫石英比色杯,一只裝入 1mL 蒸餾水,作為空白溶液,用來校正分光光度計零點及調整透光度至100。

      3、DNA純度及濃度測定

      (1)取5μL DNA 待測樣品或4μL RNA 樣品加入另一只比色杯中,加蒸餾水至1000μL,用無菌石蠟膜堵住杯口,倒轉混勻。

      (2)將兩只比色杯置分光光度計中,調入射光波長,分別用空白溶液調整零點(T 為100,OD 為0),測定持測樣品液在260nm,280nm,230nm 的 OD 值。

      (3)計算濃度:對于雙鏈 DNA 1.0 OD260=50μg/mL,DNA 樣品濃度(μg/μL)為OD260×N(樣品稀釋倍數)×50/1000。按①方式稀釋被測 DNA 樣品的濃度為其 OD260值的10倍,即 OD260=0.1時,其濃度為1μg/L。對于單鏈 RNA 1.0 0D260=40μg/mL。RNA 樣品濃度(μg/μL)為 OD260×N(樣品稀釋倍數)×40/1000。按①方式稀釋被測RNA 樣品的濃度為其 OD260 值的10倍,即 OD260=0.1時,其濃度為1μg/μL。

      (4)測定純度:純的 DNA 溶液其 OD260/OD280 應為1.8,OD260/OD230應大于2.0。OD260/OD280大于1.9時,表明有 RNA 污染,小于1.6時表明有蛋白質或酚污染。OD260/OD280小于2.0時,表明溶液中有殘存的鹽和小分子雜質,如核苷酸、氨基酸、酚等。純的 RNA 溶液其 OD260/OD280 的比值應介于1.7至2.0,OD260/OD230 的比值應大于2.0。RNA 樣品 A260/A280 的比值太小,說明有蛋白或苯酚污染;比值大于2.0,則可能被異硫氰酸胍等污染;OD260/OD230 的比值小于2.0時表明有小分子及鹽存在。


  • <td id="46i6g"><rt id="46i6g"></rt></td>
    <td id="46i6g"><kbd id="46i6g"></kbd></td>
  • <xmp id="46i6g"><option id="46i6g"></option><option id="46i6g"><option id="46i6g"></option></option>
  • <td id="46i6g"></td>
    亚洲日本va中文字幕久久道具