2.第3步可省去，改用1ml 注射器直接鉆入骨末端即可，避免剪去骨骺時損失過多骨髓細胞；
3.在分離股骨大轉子一端時，應防止折斷股骨頭；
4.如有需要，細胞懸液可用尼龍網過濾，進一步去除骨碎片及雜質。
四、實驗結果及思考題
1．在低倍及中倍鏡下觀察Giemsa染色之后的染色體制片，尋找適當的中期相。
制片應為全部染色體較集中，而各個染色體分散、互不重疊、長短收縮適中、兩條單體分開、清楚地顯示出著絲點位置、染色體呈紅紫色。
2．找出分散適度的中期染色體圖象，在油鏡下進行仔細觀察，熟悉蟾蜍染色體的形態，統計2n的染色體數目。
3．KCl溶液低滲處理與滴片過程在染色體制片中有何聯系，對制片結果各有何影響？
4．骨髓細胞染色體標本制作時，為什么要采用冰片滴片？
5．在本實驗中造成染色體標本制做不佳的原因有哪些？
1) 秋水仙素用量太多或處理時間過長，會導致染色體的過分凝縮或著絲點裂解，最終會引起染色體形態不正常，甚至被破壞或溶解。
2) 低滲處理不好。低滲液的量、處理時間均與細胞的數量有關。低滲過度，細胞會破裂；低滲不足則染色體在一起，分散不開。
3) 離心速度或離心時間的影響。離心速度過大或離心時間過長，則會引起細胞破裂；反之，離心速度過小或離心時間過短，則細胞沉降不下來，則會引起大量細胞的丟失。
4) 固定液要隨用隨配，固定徹底后再打散細胞團塊，否則細胞容易破碎，染色體分散亦受到影響。
5) 載玻片有油脂或冷卻不夠，則會影響染色體的附著和鋪展。
6) 用吸管吹散細胞時用力必須盡量輕柔，用力過大則會造成細胞破裂，而染色體也會彌散在溶液中，在隨后的離心中將會丟失。
7) 滴片時的高度很重要，高度過低細胞不會破裂；過高則染色體過于分散甚至丟失，無法辨別出染色體的準確數量。
6． 從一般意義上講，染色體標本制做的四大要點是什么？
答：A、植物血球凝集素（PHA）處理獲得活躍分裂的細胞；
B、秋水仙素處理可使細胞分裂(cell division)停止在中期；
C、低滲處理可使染色體分散；
D、空氣干燥法可使染色體平鋪在載玻片上。
參考文獻：
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2．劉涌濤,馬全祥,劉慧娟.小鼠骨髓細胞染色體標本制備中的失誤與對策.生物學通報,2003,38(6):53-54.
3. 牛蛙(Rana catesbeiana)染色體研究 朱傳炳 王瑛 激光生物學報摘要 2006-3，15卷3期
4．吳政安.兩棲類骨髓細胞的染色體標本制作方法［J］.遺傳,1982,4(1):38-39.
正確使用顯微鏡油鏡
普通型生物顯微鏡的放大倍數可達幾百倍。一般真菌和酵母菌等微生物個體較大，用低倍物鏡和高倍物鏡即可得到良好的效果。但要看到經染色的細菌的形態和真核生物細胞的形態構造，最好使用油鏡頭。
油鏡比干燥系高倍物鏡的工作距離短得多，最短的只有0.1 mm，且調焦程序又不同于干燥系物鏡，操作時須特別細心，防止油鏡壓碎標本或損壞油鏡。油鏡的正確使用方法如下：
先在干燥系高倍物鏡下找準被檢物，并置于視野中央，然后升高鏡筒約1.5
cm，再把油鏡頭旋轉至對準正下方。在玻片標本的鏡檢部位滴一滴浸液（鏡頭油），將頭偏于一側觀察，下降鏡筒，到物鏡的前透鏡與浸液接觸時停止。繼而從目鏡里細心觀察視野，旋轉粗準焦螺旋，使鏡筒緩慢地上升，剛出現不太清晰的物象時就換用細準焦螺旋，至物象清晰后進行觀察。
初次使用油鏡，也可按照干燥系物鏡的調焦程序調節焦距。即先下降鏡筒至物鏡最接近蓋玻片，但絕不能壓在標本上，再上升物鏡調焦。但此法有將浸液擠出去和造成空泡的缺點。若上調粗準焦螺旋時，鏡筒已升到油浸鏡頭離開油滴，仍不能發現被檢目的物，須重新調節。
油鏡使用的鏡頭油為香柏油或石蠟油。因香柏油黏稠度較高，使用之后擦拭較麻煩，因而許多人采用石蠟油代替使用。滴浸液時，要盡量避免氣泡的形成，如果形成了氣泡，可用解剖針尖將氣泡排在一邊，以免影響觀察。
油鏡使用完畢，提升鏡筒約2cm，把油鏡轉離光軸，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的大部分油，再用浸少量二甲苯的擦鏡紙擦去鏡頭上的殘余油跡，最后用干擦鏡紙擦去鏡頭上的二甲苯。擦拭時要順鏡頭的直徑方向，不要沿鏡頭的圓周方向擦。玻片標本上的油也要進行清潔，即把一小張擦鏡紙蓋在載玻片油滴上，在紙上滴一些二甲苯，趁濕把紙往外拉，這樣連續作三四次即可干凈（如果是使用石蠟油，清潔時只用擦鏡紙不必滴二甲苯）。