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    發布時間:2021-06-11 15:14 原文鏈接: 醫療設備簡介】全自動細菌鑒定儀(六)

      1DL-96細菌測定系統作用:

       細菌鑒定是分類學的一個組成部分,臨床細菌鑒定可將細菌鑒定至屬和種,在細菌快速檢測、細菌耐藥性檢測及感染細菌的流行病學調查中得到日益廣泛的應用。

       ①能準確可靠將有關微生物鑒定到“種”及“亞種”水平。這些細菌包括:腸桿菌科、非發酵菌科、弧菌科、奈瑟菌科、葡萄球菌屬、微球菌屬、酵母樣真菌、鏈球菌屬、腸球菌屬,合計近500余種微生物。

       ②按CLSI文件及其他出版物的信息,提示藥敏結果出現的異常表型、藥物選擇和報告中的不合理現象、以及提示檢驗者如何正確操作、臨床醫師用藥時要注意的問題等。根據CLSI標準對藥敏結果進行科學的注釋,指導臨床醫師規范用藥。

      2全自動細菌鑒定儀可用于:

       ①一般細菌培養及鑒定

       ②結核桿菌涂片檢查

       ③常規藥敏定量

       ④真菌培養+鑒定

       ⑤血培養+鑒定

       ⑥院內感染等。

      3細菌培養的臨床意義

       細菌培養與其它檢驗項目不同,由于其樣本采集易受雜菌的干擾和培養條件的限制,因而造成檢測結果有時與臨床不完全一致,故在分析細菌培養報告時應明白:細菌培養陰性不代表無細菌感染、細菌培養陽性不代表該菌一定是病原菌,應結合患者具體情況而定。

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      血液和骨髓培養:

       目前血液培養仍然是菌血癥和敗血癥的細菌學檢驗的基本方法,并且廣泛地應用于傷寒、副傷寒及其它細菌引起的敗血癥的診斷。菌血癥系病原菌一時性或間斷地由局部進入血流,但并不在血中繁殖,無明顯血液感染臨床征象。常可發生在病灶感染或牙齒感染,尤以拔牙、扁桃體切除及脊髓炎手術后等多見。敗血癥是指病原菌侵入血流,并在其中大量生長繁殖,造成身體的嚴重損害,引起顯著的全身癥狀(如不規則高熱與全身中毒等癥狀),它多繼發于組織器官感染,尤其是當機體免疫功能低下、廣譜抗生素和激素的應用及燒傷等。單次的血培養結果,對臨床無鑒別指導意義,應多次多部位采集血液進行培養,才可判定檢出菌究竟是病原菌還是污染菌。抽血時應特別注意皮膚消毒和培養瓶口的滅菌。

      2

      腦脊液培養:

       正常人的腦脊液是無菌的,故在腦脊液中檢出細菌(排除操作中的污染) 應視為病原菌。引起腦膜炎的細菌種類不同,化膿性腦膜炎病原菌多為腦膜炎奈瑟菌,除此之外尚有肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌等。

      3

      尿液培養 :

       尿液細菌培養對于膀胱和腎臟感染的及早發現和病原學診斷很有價值,對于尿道、前列腺以及內外生殖器的炎癥也有一定價值。尿液中出現細菌通常稱為菌尿癥,如果尿液本身澄清但培養出細菌,一般為標本采集時未徹底消毒尿道口引起。如果細菌培養陽性同時伴有膿尿出現,則提示有尿路感染的可能(需指出輕度感染時可無膿尿出現)。泌尿系感染常見菌為大腸埃希菌、葡萄球菌、鏈球菌、變形桿菌等,除結核分枝支桿菌外,這些細菌又是尿道口常駐菌,極易引起標本留樣污染,應注意鑒別。某些真菌疾病,如曲菌病在播散時也可造成腎臟感染,且尿中也能檢查到。尿液的細菌學培養具有重要的診斷意義,但培養陰性并不能否定泌尿道感染,一般應注意病程、采樣的時機、方法以及其它原因的影響。尿道口的消毒是中段尿細菌培養的關鍵步驟,是引起假陽性的最主要因素,故尿液細菌培養陽性要注意排除留樣污染,如果檢出菌的數量大于10萬CFU/ml,則基本可認為是病原菌。

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      痰液和咽拭子標本的培養:

       痰液及支氣管分泌物的細菌學檢驗對于呼吸道疾病的診斷、治療具有一定的意義。對無法咳痰的患者,用咳嗽后的咽拭子做培養檢查,仍是發現致病菌的主要依據。

       人體口腔、鼻咽部等上呼吸道內存在有大量的正常菌群,故痰液標本的收集易受到這些部位細菌的污染,尤以慢性呼吸道感染多見,這直接干擾細菌培養的結果。另外患者接受某些藥物的治療,使病原菌生長受到抑制,這樣也可影響陽性檢出率。因此在分析結果時,應密切結合臨床。在慢性支氣管炎、支氣管擴張和肺膿腫時,最好直接自支氣管抽取分泌物進行細菌培養。呼吸道標本的細菌常采取半定量計數,如果檢出菌的量大于正常菌群的量,可基本認為系病原菌。

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      糞便標本的培養:

       腸道中細菌種類受食物的影響,除人乳喂養的嬰兒腸道內以革蘭陽性菌為主外,其余的人腸道內均以革蘭陰性菌占優勢,一般不致病。金黃色葡萄球菌、沙門菌、志賀菌、致病性大腸埃希菌(ETEC、EAEC、EPEC、EIEC、EHEC等)、弧菌屬(霍亂弧菌、副溶血弧菌)、氣單胞菌、鄰單胞菌、小腸結腸炎耶爾森菌、假絲酵母菌、艱難梭菌、結核分枝桿菌、產氣莢膜梭菌和彎曲菌等是腸道的致病菌,肺炎克雷伯菌和奇異變形桿菌可引起嬰幼兒腹瀉。

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      無菌體液標本的培養:

       (1)胸水 胸水最常見的污染菌有凝固酶陰性葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、草綠色鏈球菌或類白喉棒狀桿菌等。漏出性胸水一般是無菌的,但應注意防止采樣污染。肺外傷或肺破裂引起的血胸,常常受到葡萄球菌、鏈球菌或肺炎鏈球菌和某些革蘭陰性桿菌等細菌侵襲而引起胸膜炎。原發性胸膜炎多由結核分枝桿菌引起,葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌、肺炎鏈球菌也可引起原發性胸膜炎。繼發性胸膜炎常為肺炎、肺結核、肺膿腫或壞疽的合并癥。細菌學檢查對臨床診斷頗有價值。

       (2)心包液 正常人的心包液量少而無菌,而滲出性心包液則系感染所致。對于急性漿液纖維素性心包炎,最常繼發于風濕熱或繼發于猩紅熱、敗血癥、牙齦的感染病灶、肺炎、膿胸、外傷或結核性胸膜炎、縱隔淋巴結炎、隔下膿瘍向心包穿破蔓延。常見的細菌性感染有乙型溶血性鏈球菌、葡萄球菌、肺炎克雷伯菌、流感嗜血桿菌、肺炎鏈球菌、銅綠假單胞菌等。慢性心包炎最常見者為結核。

       (3)關節液 關節囊內發生炎性滲出現象可能與淋病奈瑟菌、葡萄球菌及鏈球菌等感染有關。病原學診斷可由關節囊穿刺液培養獲得證實。其他部分的體液有無細菌存在以及存在何種細菌,應視其發生原因而定,并需通過細菌學檢查而確診。

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      生殖道標本的培養:

       生殖道標本的細菌學檢查對性病診斷和其它細菌感染頗有價值。正常人的內生殖器是無菌的,而外生殖器和男性尿道口、女性陰道口存在著大量細菌。尿道口常有凝固酶陰性葡萄球菌、類白喉桿菌、非致病性抗酸桿菌等,陰道口常見有乳酸桿菌、大腸埃希菌、白假絲酵母菌、類白喉桿菌等。由于生殖器官正常菌群的存在常使細菌學診斷復雜化。因此對陰道、尿道、前列腺和子宮頸分泌物等標本的采集應特別注意生殖道外部情況,以減少雜菌的污染。

       淋病是淋病奈瑟菌引起的尿道粘膜卡他性炎癥,其主要傳播途徑為性接觸直接傳染,也可被細菌污染物間接傳染。該菌主要侵犯粘膜,尤其對前尿道粘膜的單層柱狀上皮和后尿道的粘膜移行上皮有很強的親和力,故常見于泌尿生殖道感染。男性感染者可發展為前列腺炎、附睪炎,女性可引起前庭大腺炎、盆腔炎和陰道感染。革蘭染色涂片鏡檢可快速報告,但對于女性病例診斷不能單憑涂片檢查,而必須進行培養才可確診。

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      厭氧菌培養:

       (1)由厭氧菌引起的人類感染在所有感染性疾病中占有相當大的比重,有些部位的感染如腦膿腫、牙周膿腫、盆腔膿腫等80%以上是由厭氧菌引起的,其中一部分是由厭氧菌單獨感染,大部分則與需氧菌混合感染。

       (2)厭氧菌大多感染密閉無氧的組織,故下列標本無送檢價值:鼻咽拭子、齒齦拭子、痰和氣管抽取物、胃和腸道內容物、肛門拭子、皮膚和黏膜分泌物、陰道或子宮拭子、褥瘡潰瘍分泌物等。

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      真菌培養:

       真菌廣泛存在于自然界,如假絲酵母菌在人體的口腔、腸道、陰道及皮膚上均可分離出,住院患者的上述標本中假絲酵母菌的分離率可達10~20%。真菌感染常發生在基礎代謝差的患者,如大量使用激素、免疫抑制劑、長期廣譜抗生素應用者,可引起呼吸道、泌尿道感染,甚至可致敗血癥、心內膜炎、腦膜炎等嚴重感染。對痰液、糞便等有正常菌群生長的部位檢出的假絲酵母菌,應看數量多少決定治療的必要性。

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      耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)的檢測:

       MRSA是methicillin-resistant Staphylococcus 的簡稱, 其耐藥本質多由mecA基因介導產生低親和力的青霉素結合蛋白(penicillin-binding protein) PBP2a , 導致和 β-內酰胺類藥物的親和力降低而呈現耐藥。MRS陽性菌株不論其體外藥敏結果如何,對青霉素類、頭孢菌素類、碳青霉烯類、β-內酰胺/酶抑制劑的復合制劑,均無臨床療效。

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      超光譜β-內酰胺酶(ESBLS)的檢測 :

       ESBLS是extended-spectrum β-lactamases的簡稱,由質粒編碼產生,產ESBLS的大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產酸克雷伯菌、奇異變形桿菌以及其它腸桿菌科細菌,在臨床上可能耐青霉素類、頭孢菌素和單環類抗生素。目前實驗室主要檢測大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、產酸克雷伯菌和奇異變形桿菌四種細菌。產ESBLS細菌不論其體外藥敏結果如何,應用青霉素類、頭孢菌素和氨曲南藥物治療時無臨床療效。

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      HLAR(高水平耐氨基糖苷類)腸球菌的檢測:

       HLAR是high-level aminoglycoside resistance 的簡稱,對于腸球菌治療而言,氨基糖苷類、頭孢類、克林霉素和磺胺類藥物無臨床療效,臨床應避免使用。但對嚴重威脅生命的腸球菌感染,如腸球菌引起的心內膜炎,在采用青霉素類或萬古霉素(或****拉寧)進行治療時,對于非HLAR的腸球菌加用慶大霉素或鏈霉素,常可獲得協同作用。

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      AmpC酶的推斷:

       AmpC酶屬于Ambler C類或BushⅠ型β-內酰胺酶,由染色體介導產生,亦可由質粒介導產生,主要由腸桿菌屬、枸櫞酸桿菌屬、沙雷菌屬、摩根摩根菌和銅綠假單胞菌等細菌產生。AmpC酶能水解大多數青霉素、第一、二、三代頭胞菌素和頭霉素類抗菌素,高水平AmpC酶產生有兩種機制:

       ① 在誘導劑存在時暫時高水平產生,當誘導劑不存在時,酶產量隨之下降。三代頭胞菌素、棒酸、頭胞西丁和碳青霉烯類抗生素是該酶的強誘導劑。當使用三代頭胞菌素治療上述細菌引起的感染時,開始幾天治療奏效,而隨后發生耐藥時,應高度懷疑高產誘導型AmpC酶細菌的感染。

       ② 染色體上控制酶表達的基因發生突變,導致AmpC酶持續穩定高水平表達。

       CLSI尚未提供可靠而簡便的AmpC酶檢測方法,臨床可從體外藥敏試驗耐藥表型進行初步推斷,如果感染菌對第一、二、三代頭胞菌素、加酶抑制劑的復合制劑和頭霉素類抗生素耐藥而四代頭胞菌素敏感的可高度提示產AmpC酶,產AmpC酶感染菌的治療首選四代頭胞菌素和碳青霉烯類抗生素。

      14細菌鑒定的臨床意義:

       1、區別細菌種類,指導臨床提前治療

      主要區分正常菌群、條件致病菌、真菌和病原菌的感染;有些抗感染治療,只要停用抗生素即可。

       2、院內感染的流行病監測:

       引起醫院感染的致病菌的鑒定比一般的致病菌的鑒定要求要高,實驗室必須鑒定到種的水平。細菌鑒定依據表型生化反應,八進制的編碼鑒定法,必要時輔助血清學鑒定。

      15藥敏試驗的意義

       1、查出耐藥,減少治療錯誤,便于醫生選擇個體化療方案、減輕病人痛苦、節省費用。

       2、進行耐藥監測,為醫院感染控制部門提供防治依據,為經驗用藥提供可靠依據。

       3、利用耐藥監測結果控制抗菌藥物濫用,減少耐藥菌株的出現,延長新藥使用壽命。

       4、為新藥的研究和評估提供有價值的信息。

       5、作為醫院內感染流行病學調查的手段之一。

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