1931年，印度孟買產科醫院的醫生L.Wills等人發現，酵母或肝臟濃縮物對妊娠婦女的巨幼紅細胞性貧血癥狀有一定的作用，認為這些提取物中有某種抗貧血因子；
1935年，有人發現酵母和肝臟提取液對猴子貧血癥狀有一定的作用，描述其為VM；
1939年，有人在肝中發現了抗擊貧血的因子，稱為VBe；
1941年H.K.Mitchell等人發現菠菜中有乳酸鏈球菌的一個因子，稱作葉酸。
1945年，R.B.Angier等人在合成蝶酰谷氨酸時，發現以上所有的因子都是同一種物質，并完成了結構測定，之后常稱之為葉酸。所以，葉酸又叫維生素B9、抗貧血因子、蝶酰谷氨酸等。