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    發布時間:2020-04-04 00:03 原文鏈接: 喂養細胞,選好口糧之BI基礎培養基

    “喂好傲嬌的細胞,口糧選擇很重要”

    培養基供給細胞營養,

    促使細胞增殖,

    也是細胞賴以生長的環境。

    細胞要吃什么?

    選擇什么樣的培養基?

    是細胞培養能否成功的重要因素

    經典培養基包括

    MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM:F12

    McCoy's 5A 、M-199

    它們各自有什么成分?

    適用于什么細胞?

    我們又該如何選擇?

    結合BI生產的基礎培養基,我們對以上問題做了如下總結:

    1. MEM  

    Minimal Essential Medium是最基本的培養基, 設計之初是為了培養HeLa細胞以及部分哺乳類的成纖維細胞。MEM含有12種必需氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素,適合多種細胞單層生長。以MEM為基礎,Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)進一步配制成MEM-Alpha培養基,可廣泛用于哺乳動物細胞的培養。

    2. DMEM 

    Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前最常使用的改良式Eagle's培養基。DMEM與MEM含有相同的營養成分,但濃度高出2~4倍。主要用于快速生長的細胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)兩種。DMEM含更高濃度的NaHCO3,要用10%的CO?來平衡,當然也可以在較低CO?濃度下使用。

    DMEM-高糖(標準型)更適合高密度懸浮細胞培養。適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。

    DMEM-低糖(標準型)適于依賴性貼壁細胞培養,特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。

    3. RPMI-1640

    RPMI-1640營養成分比較簡單,比DMEM少一點糖和谷光甘肽,廣泛應用于許多種正常細胞和腫瘤細胞、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。

    4. DMEM :F12

    F12培養基成分豐富,含有多種微量元素,和DMEM以1:1結合,稱為DMEM:F12培養基,作為無血清培養基的基礎,以利用了F12含有較豐富的成分和DMEM含有較高濃度的營養成分為優點。
    該培養基適用于血清含量較低條件下哺乳動物細胞培養。為了增強該培養基的緩沖能力,可以在DMEM:F12(1:1)中加入15mM HEPES緩沖液。

    5. McCoy's 5A

    McCoy's 5A   Medium  最早是用于肉瘤細胞的培養所設計,可支持多種(如骨髓、皮膚、肺和脾臟等)的原代細胞的生長。除適于一般的原代細胞培養外,主要用于作組織活檢培養、一些淋巴細胞培養以及一些難培養細胞的生長支持。

    6. M - 199

    M-199培養基由Morgan等人研制,是第一個具有確定化學成分的細胞培養液,原本是用來研究雞胚原代細胞。除BSS外,含有53種成分,為全面培養基,此培養液必須輔以血清才能支持長期培養。主要用于雞胚成纖維細胞培養。M-199可用于培養多種種屬來源的細胞,并能培養轉染的細胞,廣泛用于病毒學、疫苗生產。

    除了上述培養液,BI還提供DPBS、PBS、D-Hanks和細胞培養用水。一般細胞培養時用PBS/DPBS就可以了,Hanks/DHanks一般用到原代細胞消化分離操作實驗中,如果分離時消化時間較長,建議Hanks。

    BI 基礎培養基

    BI液體培養基相關信息:

    此外,BI還擁有多種細胞輔助試劑,如下:

    (部分文字引用)


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