因為對核苷酸的特異性低，可以用來合成各種多聚物。也可以由大腸桿菌、藤黃微球菌（Micro－coccus luteus）精制出高純度的酶，分子量均約20萬，性質也相同。聚合反應時有作為引物（primer）的寡核苷酸起作用，對于反應速度幾乎沒有影響。另一方面，逆反應是從RNA或多聚物的3′-OH末端逐級水解的。
多核苷酸磷酸化酶廣泛存在于微生物中，催化以核苷二磷酸為底物合成多核苷酸的反應。多核苷酸磷酸化酶不需要DNA為模板。
在人工合成多核苷酸時，若用多核苷酸磷酸化酶的粗制品，不需要引物就可以發生反應。若用高純度的酶制品，則反應進行很慢。如果加入少量多核苷酸或寡核苷酸作引物，可使反應一開始就較快進行。該酶在催化RNA合成時，對所需引物的基本要求是引物至少含有兩個核苷酸，3’-端的羥基必須是游離的。