如何識破各種污染拯救細胞？（一）

小伙伴們遇到過這種情況嗎？

當您的課題進行到白熱化程度時

卻發現細胞被污染了

此時大家的心情可謂五味雜陳

形容一下就是

問君能有幾多愁，眼淚恰似一江春水向東流

不過，別擔心

逍鵬生物煉就火眼金睛

幫助大家識破各種污染，拯救您的細胞
 

我們先來看看污染的真面目，總結下來無非以下幾種類型：
 

我們一起來分析它們的特征：
 

1真菌-深藏不露
 

真菌之所以深藏不露，是因為它們一般不會導致培養基變渾濁，所以在污染早期，很難發現它們的蹤跡。直到長到一定規模后在鏡下可觀察到分叉細絲狀的菌絲（有些呈管狀，樹枝狀，串珠狀的菌絲）（如圖1，圖2）。這類污染中，為首的污染代表是酵母菌：顯微鏡下常見成串的珠狀物，形態呈卵形，大約比細胞小5~10倍，當其進行出芽生殖時，會聚集成連體結構；爆發污染嚴重時，會造成培養基pH值改變，不易除去。
 

圖1. 真菌污染                                                 圖2. 真菌污染
 

逍鵬生物可提供以下解決方案：
 

表1.產品列表

細菌-屢見不鮮
 

細菌種類繁多，分布廣泛，是最容易污染細胞的微生物。
 

細菌在顯微鏡下呈黑色細沙狀（如圖3），典型特征是，可以使培養基在短時間內變成黃色或白色渾濁。細胞形態會出現多角，多核狀況；貼壁細胞不附著，停止生長甚至死亡。
 

圖3. 細菌污染
 

逍鵬生物可提供以下解決方案如上表1：
 

3支原體-無孔不入
 

支原體之所以無孔不入是因為它們種類繁多，常以寄生或腐生營養方式生長，廣泛存在于環境之中。
支原體是細胞培養過程中的常見污染，經常來源于實驗人員（支原體常見于人體皮膚、呼吸道、生殖道和消化道）、動物源血清及胰酶、消毒不完全的器具。其大小只有0.15~0.3μm，所以能通過一般標準的細胞培養過濾方法，0.22μm過濾膜。其污染特征不是很明顯，增長速度相較于細菌比較緩慢，污染初期（輕微）培養基可能依然清澈不會變黃，所以輕微污染時不容易用常規方法（細胞外觀觀察或是DNA染色法）確認。

支原體會緩慢改變細胞形態、增殖、基因表達、蛋白合成及代謝反應，它攜帶的DNA/RNA與蛋白更可能造成QPCR、Western Blot或外泌體實驗結果偏差。

如下圖所示：
 

圖4. 支原體污染