抗生素由于其穩定的藥效被越來越多的使用到醫療事業、禽畜飼養當中，達到了快速高效治愈人類和動物的多種疾病，有效控制疫情傳播的效果。但是不加控制使用抗生素也會給自然環境跟人類健康帶來無法預計的反作用，嚴重威脅著人類生存。因此建立一種高效分離、綠色節能抗生素檢測手段尤為迫切。 小分子有機溶劑雙水相萃取體系作為一種新型的分離體系，已經引起了研究學者們的日益關注，由于該分離技術操作簡單，萃取條件溫和，不會使物質失活變性，且小分子有機物成本低廉，易于實驗放大，因此在生物、醫藥、環境、食品等領域得到了廣泛的應用。已有的小分子有機物雙水相體系萃取技術大多采用一元體系進行萃取，對于二元體系的研究十分少見。本課題根據雙水相萃取技術的成相原理，在一元雙水相體系的基礎上，利用不同種類的小分子醇溶劑的特性及優點，構建新型的小分子醇二元雙水相體系，并將其應用于環境中四環素類抗生素殘留的分離/富集。為抗生素殘留的分析、檢測研究提供了新的實驗依據。 本課題基于傳統雙水相萃取理論的基礎上建立：小分子醇/鹽二元雙水相體系，將四環素類抗生素鹽酸土霉素作為目標抗生素，考察了影響因素對其分配行為的影響。通過鹽酸土霉素分配行為的變化，確定體系組成物質的種類和比例、分相鹽的種類和濃度、pH、溫度等。在最佳實驗條件下，建立正丁醇/乙醇/NaH2PO4二元雙水相體系改變分相鹽種類及濃度、pH、溫度、靜置時間，最終得到鹽酸四環素的萃取率為94.6%，將該結果與一元小分子醇雙水相體系萃取四環素類抗生素的研究結果比較發現萃取率較高。 建立正丁醇/乙醇/(NH4)2SO4二元雙水相體系，考察了半合成類四環素（鹽酸多西環素）在該體系中的分配行為，改變影響因素分相鹽種類及濃度、pH、溫度、靜置時間、抗生素加入量等，得到鹽酸多西環素在最佳萃取條件下的萃取率為92.25%。通過實驗研究得出小分子醇二元雙水相體系具有：小分子醇類物質價格低廉、綠色污染小、可回收利用，不同種類的小分子醇可降低彼此缺點形成更加完善的整體；二元體系成相快、無乳化現象、分離效果好等優點。