1. 實驗原理
QuikRead U-ALB是一種以微粒子包被的抗人白蛋白血清為基礎的免疫比濁試驗。存在于樣本中的白蛋白和微粒子反應,溶液中濁度的最終變化通過QuikRead儀器被測定。
尿樣本被加入緩沖液中在同一比濁杯中進行分析測定。試劑被預先定標,特定批號的標準曲線被記錄在試劑盒提供的磁卡當中。
QuikRead U-ALB和使用比濁法獲得的結果相關性良好。
2. 標本采集
2.1 標本采集前病人準備:無需特殊準備
2.2 標本種類:夜尿或隨機尿
2.3 標本要求:QuikRead U-ALB試劑盒直接用尿樣本(未稀釋的樣本)進行檢測。尿樣本中不建議添加防腐劑。
夜尿樣本的采集:采集的夜尿樣本,要求至少采集6小時的夜尿。記錄采集尿樣本的時間和尿量。白蛋白的排泄率可根據以下公式計算:
總尿量(ml)*QuikRead U-ALB濃度值(mg/l)/采集時間(min)=尿微量白蛋白的排泄率(ug/min)
隨機尿樣本:在隨機尿樣本中,使用首次晨尿樣本可獲得十分可靠的結果。
貯存樣本在測試以前要求尿樣本達到室溫。
3. 標本儲存:尿樣本2-8℃可貯存14天。尿樣本不應當被冰凍保存。
4. 標本運輸:室溫運輸
5. 標本拒收標準:細菌污染、乳糜尿
6. 試劑
6.1 試劑名稱:QuikRead U-ALB 試劑
6.2 試劑生產廠家:Orion coporation Orion Diagnostica
6.3 包裝規格:50Test/kit
6.4 試劑盒組成:
6.5試劑儲存條件及有效期:試劑2-8℃貯存。緩沖液可在室溫下(2
-25℃)貯存。試劑的穩定性可達到試劑盒上印的有效期。
7. 儀器設備
7.1儀器名稱:QuikRead 分析儀
7.2儀器廠家:基恩科技有限公司
7.3儀器型號:QuikRead 型
7.4儀器通道選擇:采取兩個發光二極管:654μm,950μm;吸收范圍:0.0-2.5
7.5儀器校準程序:每個試劑盒有一個已知的校正數據,它記錄在磁卡上,用以確定分析曲線,讓磁卡通過儀器上讀卡器,該數據信息就能送入QuikRead儀器之中,然后儀器就處于等待使用狀態。
8. 操作步驟
8.1 Read the card (閱讀磁卡):將磁卡在儀器的閱讀槽中刷過,磁卡的磁帶面向自己。
8.2 Ready for use U-ALB (準備進行U-ALB測定)
8.3 Measuring blank
8.3.1 使用
QuikRead分液器加1ml緩沖液到比濁管中。
8.3.2 用毛細吸管加20μl不稀釋的尿樣本到比濁管中。(參照注意事項)
8.3.3 將U-ALB試劑帽蓋于比濁管上擰緊。輕輕混勻(不能顛倒)。不要按壓試劑帽的內側部分。不要觸摸比濁管下部的光潔部分(光學測定部分)。
8.3.4 把比濁管插入到儀器的檢測孔中
8.4 Blank measure(測定空白):儀器測定樣品空白。這最多需要30秒時間。在檢測孔中讀空白期間不要觸摸比濁管。
8.5 Add reagent(加試劑)
8.5.1 按下試劑帽的內側部分(例如,可以用手指或者一支筆來按)。如此將使U-ALB干粉試劑加到比濁管中。
8.5.2 從檢測孔中拿出比濁管,快速地顛倒混勻。比濁管中的溶液變成白色混合物。
8.6 Shake the cuvette(混勻試管):屏幕顯示:告訴你需要多長時間來混勻比濁管(6秒時間)。移動的一串點表示你混勻的速度。
8.7 Insert the cuvette for measurement (插入比濁管進行測定):混勻結束后儀器發出三次短暫的嘟嘟聲,立即放置比濁管于儀器的檢測孔中。假如比濁管沒有放置檢測孔中,三秒鐘后試驗將作廢。
注意1:不要觸摸比濁管下部的光潔部分(光學測定部分)
注意2:假如比濁管沒有在規定的時間內放置于檢測孔中儀器將顯示信息“cuvette inserted too late(比濁管插入太晚)”
8.8 Measuring120s (測定120s):儀器在2分鐘內測定出尿微量白蛋白的濃度。結果顯示在屏幕上,單位是mg/l.在實驗完成之前屏幕上顯示實驗所需的最多剩余時間。
注意1:在結果沒有出來并記錄下來之前,不要將比濁管從測定孔中拿出來。如果拿出來的話會立刻中斷測定。
注意2:檢查試劑帽的底部塑料物是否脫落在比濁管的下部。如果在比濁管的下部存在試劑帽的底部塑料物,這可能干擾檢測過程。
9. 結果判斷與分析:QuikRead 在5-150mg/l之間直接從儀器屏幕給出數字值。
10. 質量控制:定期使用U-ALB 質控液(Cat.No.67881)。QuikRead U-ALB質控液的瓶子上標有U-ALB的靶值。
11. 計算:直接讀取屏幕上顯示的數字結果即可。
12 參考值范圍:
夜尿樣本:<20μg/min; 隨機尿樣本:<20mg/L
13. 臨床意義:尿微量白蛋白升高是糖尿病、高血壓病并發腎病的早期的危險指標。腎病是糖尿病最普遍的并發癥之一,國際上認為糖尿病病人應當監控早期腎病(1)。由于微量白蛋白提示早期腎病,因此糖尿病病人每年應當進行多次尿白蛋白的檢測。微量白蛋白尿的及時檢測十分重要因為時期干預能阻止甚至逆轉腎病的進程。由于高血壓病人可能發展成為微量白蛋白尿,因此定期檢測尿白蛋白濃度對他們也十分有益(2)。微量白蛋白尿被定義為夜尿樣本中白蛋白的排泄率為20-200ug/min或者隨機尿樣本中白蛋白的濃度為20-200mg/L。在3-6個月期間三次尿樣本中至少有二次陽性被診斷為微量白蛋白尿(3)。
14. 操作性能
14.1方法成熟、結果可靠、操作簡便、報告快速(3分鐘內出結果)、采樣方便(20μl尿液)、定量測試(5-150mg/L)、尿蛋白在40g/L范圍內不會出現抗原過剩無須尿蛋白化學檢測預篩。
14.2 回收率:90%-1