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    發布時間:2019-03-30 15:43 原文鏈接: 巴馬汀提取及延胡索素制備的方法

    實驗材料

    黃藤粗粉

    試劑、試劑盒

    EtOH乙醇甲醇鹽酸氯化鈉KBH4氫氧化銨碘化鉍鉀試液氯仿硅鎢酸試劑苦味酸試劑鞣酸試劑

    儀器、耗材

    吸管錐形瓶抽濾瓶烘箱紅外線燈硅膠CMC- Na薄層板氨缸

    巴馬汀為季銨生物堿,溶于水和極性大的有機溶劑(如甲醇、乙醇等)所以可用甲醇、乙醇或水進行提取。然后通過鹽析,降低其在水中的溶解度而沉淀,與其它雜質分離。巴馬汀是有機堿,盡管它帶正電荷,但和水的親和力仍小于NaCl,NaCl和水的強親和力,降低了巴馬汀在水中的溶解度,使它被“擠”出。


    1.工藝


    (1)提取:黃藤粗粉20g,用95%EtOH回流提取2次,每次1小時,乙醇用量為100ml,合并二次醇提取液,濃縮至3~4ml,用吸管轉移到5ml小錐形瓶中,放置,析晶,抽濾得巴馬汀粗晶。


    (2)分離:將巴馬汀粗晶用10ml水溶解后,抽濾。不溶物主要為黃藤內酯。濾液滴加 HCl至PH2,再加10%NaCl進行鹽析放置,析出黃色不溶物,抽濾得氯化巴馬汀粗晶。


    (3)精制:用70%EtOH熱溶氯化巴馬汀粗晶,過濾,濾液析晶,抽濾,得精制氯化巴馬汀。干燥稱重——克,測溶點——℃。


    (4)氫化:精制氯化巴馬汀用50%甲醇溶液,加入因體KBH2約0.2g,直到甲醇液迅速由黃變白或微黃色。滴加HCl至PH2并加熱使多余的KBH4分解,再趁熱滴加NH4OH使反應液呈堿性,立即析出鱗片狀四氫巴馬汀粗晶,抽濾得結晶,紅外線燈下干燥,再用EtOH-H2O重結晶,得精制四氫巴馬汀。干燥稱重 —— 克,薄層層析檢查純度。熔點—— ℃。


    2.巴馬汀原位還原反應


    在硅膠CMC- Na薄層板的起始線上點自制的巴馬汀乙醇液,及對照品巴馬汀乙醇液及四氫巴馬汀乙醇液。然后再在自制的巴馬汀的原點加點2%KBH4甲醇液2~3次,吹干,氨缸中飽和后,以CHCl2OH(3:1)展開,改良碘化鉍鉀試液顯色。巴馬汀Rf值0.4左右,四氫巴馬汀Rf值約0.9,進行原位反應的巴馬汀如氫化徹底,應和對照品氫巴馬汀的Rf值一致,如反應不徹底則出現二個斑點,其Rf值分別與對照品巴馬汀及四氫巴馬汀一致。


    黃藤中生成堿的檢識:


    1.生物堿沉淀反應


    取黃藤的15醋酸浸出液每份1ml,置小試管中,分別滴加下列各試劑2~3滴,觀察并記錄有無沉淀產生及顏色變化。


    (1)碘化鉍鉀試劑


    (2)硅鎢酸試劑


    (3)苦味酸試劑(樣品液需調至中性)


    (4)鞣酸試劑


    2.薄層層析


    硅膠-CMC- Na薄層


    樣品 巴馬汀,小檗堿,藥根堿,延胡索乙素,制備巴馬汀后的母液,鹽析后的水母液展開劑氯仿-甲醇(3:1),展開前薄層板先在氨缸中飽和5分鐘。


    顯色 先在紫外燈下觀察螢光下觀察螢光,然后再噴以改良碘經鉍鉀試液顯色如果用中性或堿性氧化鋁薄層,展開劑可用氯仿。


    記錄:薄層層析圖譜。說明各母液中還有什么化合物。


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