Ag為待測抗原，AgAb-E為結合標記物，Ab-E為游離標記物。若抗原-抗體反應影響標記物中酶的活性,如酶活性消失，即結合標記物(AgAb-E)無酶活性，游離標記物(Ab-E)有酶活性；
(1) 檢測時不需分離結合標記物(AgAb-E)和游離標記物(Ab-E),檢測體系中標記物酶活性(Ab-E)與抗原含量成反比，此為均相酶免疫試驗，抗原-抗體反應均在液相中進行。
(2) 而抗原-抗體反應未影響標記物中酶的活性，檢測時需分離結合標記物(AgAb-E)和游離標記物(Ab-E),結合標記物酶活性與抗原含量成正比，此為異相酶免疫試驗。異相酶免疫試驗又可根據反應體系中是否使用固相支持物作為抗體(抗原)的載體，將其分為液相和固相酶免疫試驗兩種類型。
2、ELISAPOT基本原理；
ELISAPOT即酶聯免疫斑點檢測，結合了細胞培養技術與ELISA技術，能夠在單細胞水平檢測細胞因子的分泌情況。
ELISAPOT從本質上說和ELISA的原理是一樣的。
細胞受到刺激后局部產生細胞因子，此細胞因子被特異單克隆抗體捕獲。細胞分解后，被捕獲的細胞因子與生物素標記的二抗結合，其后再與堿性磷酸酶標記的親和素結合。
BCIP/NBT 底物孵育后，PVDF孔板出現“紫色”的斑點表明細胞產生了細胞因子，通過ELISPOT 酶聯斑點分析系統對斑點的分析后得出結果。