答：1. PEG的分子量與濃度: 細胞融合效果與PEG的分子量及其濃度成正比；但PEG的分子量越大、濃度越高, 對細胞的毒性也就越大。為了兼顧二者，在實驗時常常采用的PEG分子量一般為1000~4000，濃度一般為40~60%。2. PEG的pH值: 經驗證，PEG的pH值在8.0~8.2之間融合效果最好。3. PEG的處理時間: 處理時間越長，融合效果越好, 但對細胞的毒害也就越大。故一般將處理時間限制在1分鐘之內。本實驗中細胞融合后無需繼續培養, 故處理時間可適當放寬至數分鐘。4. 融合時的溫度: 由于生物膜膜的流動性與溫度成正比，故細胞的融合效果也與溫度成正比。因此，為了獲得更好的融合效果, 在細胞可能承受的溫度范圍內可適當提高處理的溫度。對于哺乳動物的細, 一般采用的溫度為38~40℃。
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