徠卡生物顯微鏡的超薄切片的定量x射線微區分析

徠卡生物顯微鏡不論外源佐的還是體內存在的物質，作x射線微區分析時，除鑒定其成分外，還需給出“量”。這“量”（即濃度）有相對及兩種表示方法。

徠卡生物顯微鏡為測試成分的濃度，L為測試成分的峰高tl為在分析區域內全部質量的x射線強度，即連續射線的高度。由于有機物與無機物的平均原子密度相差甚大，用超路切片100一200nm標本做分析時使出現了困難。因為待測試成分的質量相對很少．而來源于超薄切片，支持膜、金屬網及標本托等的背景（即連續X射線）十分強，連續譜的計數與其成分原于序數的平方z”成正比，因而高原子序數的元素產生的連續語的強度要比有機物的連續諾強度大得多。如Oq（z＝76）的連續諾強度比相同濃度的生物學材料的連續譜強度高100倍。因此便集中考慮以超薄切片（其主要成分為C，N．O和H）為背景，而不再考慮支持網，金屬托等的影響。于是人們制各組成與所測試的樣品相似的標準樣品，將測試樣品的特征x射線強度與已知濃度的標準樣品特征x射線強度在相同測試條件下比較，便是徠卡生物顯微鏡超簿切片標本定量方法的基本原則。

徠卡生物顯微鏡為測試成分濃度，r5為標準樣品的已知濃度，入及人分別為測試成分和已知成分的峰高。由于在生物學標本的較輕元素的濃度范圍內，可以不做原子序數對連續譜效應的校正，因此上式可寫為

徠卡生物顯微鏡一個重要的問題便是定Pd值，基本方法是制各生物標本的類似物。要求該類似物勻質，含有與生物標本同樣的輕元素。外加一種元素r其濃度范圍在生物標本所含的范圍內，在電子轟擊時應穩定，而且在100nm厚的切片中應有化學上的均勻性。這種生物標本類似物很多，如Na和k（NaCNS及KCNS）镕子Sp毗樹脂，700C聚合后超薄切片，所余的聚合塊涪于酵以定Na及K的濃度。再如牛血清白蛋白，牛胰島京和Phmnun中均共價結合有已知化學計量濃度的5和尸。這些蛋白可做為含5和尸的生物標本類似鉤”。但這些生物標本類似韌并不能包羅生物標本中所有的成分，往往是“類似物”。幸運的是如果已知某一種元素的H，其它所有元素的H／‘均能間接求出。因為一切生物材料的元素的連續譜都在相同的能帶中，元素的u／x值有如此關。因此若徠卡生物顯微鏡測量出其它萊一元素的此g2了（Ej），其u7*很容易求出。當持測元素約Iyf已知后，將x射線信號輸入檢測系統，經計算機處理后，便可直接給出元素的濃度（m01A8）。