正確采集臨床微生物標本，直接影響到微生物培養鑒定結果。可靠的檢驗結果可以指導臨床診斷治療，為臨床科學用藥和成功的感染控制提供依據，是正確、合理使用抗菌藥物，延緩細菌耐藥，減少抗菌藥物濫用和監測醫院感染的第一步，也是最重要的一步。為此應正確采集各種細菌學標本。
一、 血液標本的采集
1、 采集方法
（1）75%酒精清潔局部皮膚。
（2）待皮膚干后，再用2%—2.5%碘酒從穿刺點中心部位開始消毒，范圍不應小于5cm（直徑），且不能用手指觸摸消毒后的皮膚。
（3）皮膚碘酒干后（約1min），穿刺采集血液，采血量成人5-10ml，嬰幼兒1-5ml。
（4）采血后立即在床旁接種培養瓶，并迅速輕搖，充分混勻防止凝固，但又不可劇震以防溶血。
2、注意事項
（1）懷疑菌血癥應盡早采血，體溫上升（38.5℃）采血可提高陽性率，但也要防止因等待而延誤時機。
（2）對已經使用抗菌藥物，而又不能停藥者，也應在下次用藥前采血。切忌不要在靜滴抗菌藥物的靜脈處采取血標本，也不能從靜脈導管及動脈插管中取血。
（3）培養基與血液之比以10:1為宜，以稀釋血液中的抗生素，抗體等殺菌物質；有人主張對接受抗菌藥物治療的病人，培養基與采血量之比可為20:1或大于這個比例。
（4）近年研究表明，將血液注入血培養基前，更換針頭反而易導致污染。
（5）每例至少采血兩次，間隔0.5-1h，以利于提高陽性率和區分感染菌與污染菌。
（6）疑為細菌性心內膜炎及布魯氏病的病人，以肘動脈或股動脈采血為宜，除在發熱期采血外，并要多次采血（24h 3-4次）和增加采血量（可增加10ml）。
（7）采血后立即送檢，如不能立即送檢可置室溫，而不能放置冰箱。
（8）如臨床表現很似敗血癥，而血培養多次陰性者，提示考慮厭氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的采集
1、采集方法
在病灶部位或髂前（后）上脊處嚴格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培養瓶內。
2、注意事項
（1）骨髓內含有大量的單核巨噬細胞系統的細胞，因而骨髓培養對傷寒病人的診斷較血培養優越。
（2）用于懷疑細菌性骨髓炎病人。
三、靜脈導管標本的采集
1、采集方法
（1）常規導管部位皮膚消毒。
（2）無菌方法從病人體內拔出靜脈導管，剪下導管尖端5cm，放入無菌瓶中。
（3）立即（15min內）送檢，避免標本干燥。
2、注意事項
（1）剪下的導管立即接種血平皿，可提高陽性率。
（2）肉湯反復沖洗導管腔內，沖洗液做定量培養。
（3）有人將剪下的導管置肉湯增菌液或培養瓶中，此法不能區分導管感染菌與少量定植菌。
（4）衛生部在《醫學感染診斷標準》（試行）（2001年1月3日施行）中規定：導管管尖培養其接種方法應取導管尖端5cm，在血平板表面往返滾動一次。細菌≥15cfu/平板，即為陽性。
四、呼吸道
1、痰標本
（1）采集方法
①清晨起床后用涼開水漱口多次，以除去口腔內大量雜菌，用力咳出肺深部的膿痰，置于清潔干燥容器中送檢。
②痰量極少者可用45℃ 3%-10%的氯化鈉溶液約25ml霧化。對于咯痰量少的幼兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，當其咯痰后用無菌棉棒采集標本。
③咳嗽無力或昏迷病人，可用吸痰管經鼻腔或口腔經氣管腔內吸引痰液送檢。
④氣管切開者可以深入透氣孔中取痰。
⑤可用支氣管鏡直接在病灶部位采集高濃度的病原菌。
⑥用無菌導管經鼻腔插入氣管鏡內，緩慢注入無菌蒸餾水5ml，取出導管。留取患者在3h內咳出的痰液，放入無菌容器中送檢。
⑦胃內采痰法。無自覺癥狀的結核病人。有時可把痰誤咽入胃內，因而可采用胃內溶物做結核菌培養，其陽性結果比咯痰高10%左右，該方法于晨起空腹時，把滅菌的胃管，從鼻腔送入胃內，用20ml注射器抽取胃液。
（2）注意事項
①痰標本的采集以晨痰為準，此時患者痰量較多且含菌量也多。
②標本采集后立即送檢，若不能及時送檢者，可暫存2-8℃冰箱。若晚1-2h接種，會失去苛氧菌，并使得革蘭陰性菌過分生長。
③可接受的標本：痰；支氣管灌洗液，支氣管刷，支氣管活檢；肺吸出物和肺活檢。不能接受的標本：唾液；24h留的痰（結核桿菌培養除外）；拭子。
④ 痰標本的質量評價：（用顯微鏡篩選）在低倍鏡下，檢查鱗狀上皮細胞，至少10個視野，集中在有白細胞處，合格標本為白細胞與鱗狀上皮細胞比例大于2:1。
2、鼻拭子
（1）用濕的拭子（生理鹽水）；
（2）需插兩個鼻孔；
（3）深入3.3cm左右，轉動4-5次；
（4）以上用于診斷金黃色葡萄球菌暴發時的鼻帶菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
（1）采集方法（到細菌室取專用拭子）
①患者清水漱口后，由檢查者將其舌外拉，用棉拭子將咽后壁或懸雍垂的后側反復擦拭數次；
②化膿性扁桃體炎、口腔念珠菌病時，直接用棉拭子在病灶部位擦拭；
③插入運送培養基中立即送檢，防止干燥。
(2)注意事項
①棉拭子應避免觸及舌、口腔黏膜和唾液；
②采集標本前數小時不可用消毒藥物漱口或接觸病灶局部。
五、胃腸道
1、糞便
（1）采集方法
選取膿血、黏液糞便2-3g，液體糞便取絮狀物1-2ml。盛于滅菌瓶中或蠟紙盒中及時送檢。
（2）注意事項
①標本要采集新鮮的，陳舊標本影響陽性檢出率；
②切忌糞尿混合；
③若要分離阿米巴，標本要立即送檢并注意保溫；
④運送培養基可提高陽性率；
⑤分離難辨梭菌時需選不成形或水樣便；
⑥霍亂弧菌、大腸桿菌Ο157感染的腹瀉便則為水樣便或血性便；
⑦標本在病理早期或治療前采集；
⑧一般認為用抗菌藥三天后，標本培養病原菌陰性。
2、肛拭子
在無法獲得糞便的情況下，可用經無菌甘油水或無菌生理鹽水濕潤的肛拭子插入肛門4-5cm（幼兒2-3cm）處，輕輕旋轉擦取直腸表面黏液后取出，置運送培養基中送檢。
六、泌尿道
根據衛生部《醫學感染診斷標準》（試行）通知，泌尿系統臨床診斷為：患者出現尿頻、尿急、尿痛等尿路刺激癥狀，或有下腹觸痛、腎區叩痛、伴或不伴發熱，并具有下列情況之一：
（1）尿檢白細胞男性≥5個/高倍視野，女性≥10個/高倍視野，插導尿管患者應結合尿培養；
（2）臨床已診斷為泌尿道感染，或抗菌治療有效而認定的泌尿道感染。
1、中段尿
（1）采集方法
①女性 采樣前用肥皂水或0.1%的高錳酸鉀溶液沖洗外陰，用手指江陰唇分開排尿，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml于滅菌容器內。
②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0.1%的碘伏溶液消毒尿道口，滅菌紗布擦干，上翻包皮，棄其前段尿，不終止排尿，留取中段尿10ml于滅菌容器內。
（2）注意事項
①導尿雖然可以減少污染，但是多次重復導尿可以造成逆行性感染，因此近年來大多采用中段尿。
②女性病人最好采取膀胱截石位由護士采取標本，減少污染。
③采集標本以晨起第一次尿液為佳。
④采集標本后，若不能在1h內送檢，暫放4℃冰箱，但不能超過8h。若尿液標本在室溫下放置超過2h，即使接種培養結果細菌數≥104 cfu/ml獲103cfu/ml,也不能作為診斷依據，應重新留取標本送檢。
⑤疑為尿道炎時可將最初3-4ml尿液收集在滅菌容器內。該尿中即使有少數細菌，如反復檢查為同一細菌，也應考慮為病原菌。
⑥兒童在多數情況下，僅沖洗外陰是不夠的，故采集標本較為困難。如果尿內細菌明顯增多，可以高度懷疑為尿路感染，無菌則可否定。
⑦若細菌培養結果為兩種或兩種以上細菌，需考慮污染可能，建議重新留取標本送檢。
⑧尿液中不得加入防腐劑，消毒劑否則影響陽性檢出率。
2、膀胱穿刺采集法
避免污染是很困難的，培養結果與病情不符時，或尿厭氧菌培養，或嬰幼兒中段尿采集困難時，可以用恥骨上穿刺膀胱內采尿。
3、留置導尿者采集法
拔去閉式引流的集尿袋，棄去導尿管前段尿液，留無污染的膀胱內尿液10ml送檢。不可從集尿袋下端留取標本。
七、腦脊液
1、采集方法
由臨床醫師以無菌方法收集腦脊液3-5ml（細菌1ml，真菌2ml抗酸桿菌2ml，病毒1ml）盛于無菌試管或小瓶中立即送檢。
2、注意事項
（1）采集標本后立即送檢，因腦膜炎奈瑟菌離體后迅速自溶，肺炎鏈球菌及流感嗜血桿菌也易死亡；
（2）疑為上述細菌感染時，應注意保溫，不可置冰箱或低溫保存。
八、膽汁
1、十二指腸引流法
在無菌操作下，將十二指腸導管吞咽至十二指腸乳頭部（距齒65-70cm）時，收集A液（來自總膽管，為橙黃或金黃色），隨之注入25%硫酸鎂溶液40ml，經1-2min后再采取B液（來自膽囊，為棕黃綠色），隨后收取C液（來自肝膽管，為檸檬色），一般認為B液做細菌培養意義較大。
2、膽囊穿刺法
膽囊造影術時，可同時采取膽汁。
3手術采取法
由總膽管、膽囊直接穿刺采取膽汁。
以上采集之標本應立即送檢，否則置于4℃冰箱內，采集時需小心，避免被唾液、十二指腸液細菌污染。
九、穿刺液標本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、關節液、鞘膜液。
1、采集方法
由臨床醫師行穿刺術抽取。胸腹水可收集5-10ml,心包液、關節液收集2-5ml，置于無菌含抗凝劑的試管或小瓶中，充分混勻后，立即送檢。抗凝劑10%EDTA二鈉鹽，標本與抗凝劑之比10:1。
2、注意事項
⑴標本采集應在患者用藥之前或停止用藥1-2天后進行；
⑵不能立即送檢可置4℃冰箱保存；
⑶疑為淋病性關節炎患者的關節液，采集后立即送檢，或床旁培養為佳；
⑷不能用棉拭子浸蘸標本送檢。
十、膿汁及病灶分泌物
1、傷口
⑴表面傷口拭子采集方法及注意事項
① 僅限于皮膚與皮下組織，包括手術切口、褥瘡潰瘍、新生兒臍炎、嬰兒膿瘡病。
②用無菌生理鹽水或75%的酒精擦去病灶表面滲液；
③用無菌棉拭子抹去及較深部的膿汁分泌物或組織送檢；
④采集褥瘡潰瘍標本時應采集褥瘡邊緣的膿性分泌物，拭子放在運送培養基中立即送檢，不要采集創口表面的滲液。
⑵傷口、膿腫、竇道、壞疽組織采集方法及注意事項
①閉鎖性膿腫用碘酒和酒精消毒皮膚后，用滅菌注射器穿刺抽取全部膿液送檢，疑為厭氧菌感染時，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢；
②傷口處若有膿及滲出物要用無菌棉簽深入各種竇道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手術切除獲得深處傷口標本；
③當創傷出血時，敷有藥物在2h以內及燒傷在12h內均不應采集標本，此時獲得陽性結果機會甚少。
④采集標本注意觀察膿汁及分泌物性狀、色澤、氣味等。可為培養鑒定提供依據。
⑶燒傷創面
①燒傷創面需要膿性分泌物，焦痂迅速分離變棕黑、黑或紫羅蘭色，燒傷邊緣水腫。患者發燒>38℃或低體溫<36℃，合并低血壓。
②用無菌生理鹽水沖洗傷口創面。
③由于創面部位不同，細菌種類也不盡相同，要用滅菌棉拭子采集多個部位的炎癥區送檢。
④采集痂下變黑或變性的不健康區邊緣或引流液等做定量培養及組織活檢。
2、厭氧傷口拭子
⑴厭氧專用棉棒或玻璃棒觸及深部膿汁；
⑵可用注射器抽吸，排去針管內空氣將針頭插入滅菌橡膠塞內送檢；
⑶立即送檢，送檢過程中必須保持在無氧條件；
⑷不宜做厭氧菌培養的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齒齦拭子、直腸、陰道和宮頸拭子以及回腸、結腸造瘺術的流出物，胃、小腸及大腸內容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用無菌紗布擦拭和清洗尿道口，然后采取從尿道口溢出的膿性分泌物；
⑵采集前列腺液時，先將尿道、膀胱沖洗，然后從肛門用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出；
⑶女性病人先用滅菌紗布或棉拭子仔細擦拭或清洗尿道口，然后從陰道內診壓迫尿道，使分泌物溢出；
⑷取子宮頸分泌物，先用內窺鏡擴張陰道，然后從宮頸口用滅菌棉拭子采取分泌物，盡量避免被陰道宮頸附近正常菌群的污染。
4、蜂窩織炎
⑴用無菌生理鹽水或酒精消毒皮膚；
⑵用細針在炎癥最顯著處穿刺吸引；
⑶抽少量滅菌生理鹽水在針管內；
⑷注入無菌試管內送檢。
5、組織標本
⑴活體組織采取的微量標本，可直接接種在培養基內；
⑵表淺組織可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去；
⑶較大組織塊的表面可采用燒灼或浸入沸水中5-10s，然后用滅菌剪刀切開，取其中的膿汁；
⑷深部組織標本可經皮膚穿刺或手術切取送檢；
⑸組織標本不可用福爾馬林固定；
⑹有時也可將沾有膿汁的最內層敷料放入無菌平皿內送檢。
十一、眼標本采集
⑴一般細菌，以無菌棉拭子采集眼分泌物，尤其膿性分泌物；
⑵沙眼衣原體，首先擦去眼結膜上面的分泌物，然后用無菌小刀刮取穹窿部及眼結膜上皮細胞，用鏈霉素處理后備用；
⑶對于剛治療或藥物沖洗過的患者最好12-24h后采集標本；
⑷對于淚囊炎患者可稍加擠壓后以無菌棉拭子采集標本。
檢驗科的醫院感染管理
檢驗科的醫院感染管理應達到以下要求。
⑴必須履行衛生部《醫院感染管理規范（試行）》中第十七條的有關規定。建立健全本科室醫院感染控制，防止微生物擴散及個人防護制度并嚴格執行。
⑵布局合理，工作區與生活區分開，設置專門的清洗、消毒間并有明顯的標記。
⑶檢驗科的每個工作區應設有非手觸式洗手設備并配備手消毒用品，操作完畢后，及時進行手的清潔與消毒。
⑷保持室內清潔，操作臺、各種物體表面及地面，每日必須進行兩次常規清潔消毒，發生污染及時消毒。
⑸無菌間和超凈臺必須保持清潔及定期消毒。無菌間應配備空氣消毒設備，超凈臺的紫外線消毒燈應定期監測有效強度，按要求記錄。
⑹工作人員進入工作區必須穿工作服，戴工作帽，必要時穿隔離衣、膠鞋、戴手套并嚴格執行實驗室操作規程。
⑺嚴格執行無菌操作規程。靜脈采血必須一人一針一巾一帶；微量采血做到一人一針一管一片，對每位病人操作前應洗手或手消毒，禁止戴工作手套進入非工作區。
⑻必須使用具有國家規定資質的一次性檢驗用品，并在有效期內使用。無菌物品如棉簽、棉球、紗布等及其容器應在開啟后24h內使用。
⑼重復使用的器具用后，必須無害化徹底清洗干凈后消毒或滅菌。
⑽廢棄的病原體培養基，菌、毒種保存液等，必須就地消毒滅菌，按醫療廢物管理的有關規定轉運、暫存或焚燒。
⑾實驗動物室必須按國家有關規定進行嚴格管理，防止動物逃逸或造成人與動物的交叉感染；實驗后的動物，必須焚燒處理。
⑿菌種、毒種按《中華人民共和國傳染病防治法》管理。