抗血清的制備

一、目的：

1、了解抗血清制備的基本過程：

2、掌握抗血清的收集和保存方法。

二、原理：

抗血清為含有某一類具有特異免疫功能的抗體分子的血清，一般為動物被人工注射某類抗原后制備的動物血清。高效價的抗血清用于研究工作以及疾病的診斷和治療。

一種抗原能否引起抗體生成反應，一方面取決于抗原分子表面有無抗原決定簇（Antigenic determinant），另一方面取決于機體的免疫狀態，當具備以上兩個條件后，抗體生成將遵循抗體生成的一般規律——初次反應和再次反應。

抗原的種類繁多，包括天然的蛋白質抗原和細胞性抗原、合成性抗原以及基因工程抗原等，不同的抗原免疫動物具有不同的特殊性。一般完全抗原免疫動物需加用佐劑，尤其在使用可溶性抗原時，以期得到高效價的抗血清；合成性抗原和基因工程抗原等半抗原物質需先通過人工的方法與蛋白質載體連接后再與佐劑混合免疫動物，方可獲得理想的免疫效果。使用佐劑后可增加抗原的免疫原性和延長抗原在機體內存留的時間，從而改變了抗原原有的免疫原性。

三、材料：

1、金屬編號牌（對動物作標記錄）或染料；

2、1毫升，5毫升、20毫升注射器；

3、采血針頭（9#，12#），卡價苗針頭（41/2  # — 51/2  #）；

4、滅菌平皿，疫苗瓶，青霉素瓶，皮塞以及吸管，脫脂棉；

5、卡介苗（75mg/ml）；

6、抗原（小鼠血清）；

7、青霉素溶液，鏈霉素溶液和5%葡萄糖溶液；

8、液體石臘（醫用），羊毛臘（配制佐劑用）；

9、滅菌生理鹽水，消毒用酒精，2.5%碘酒；

10、1.5%瓊脂，玻板，飯盒（保濕、保濕作用）；

11、實驗動物（家兔）。

四、實驗步驟

1、動物的選擇

羊、馬、雞、猴、豚鼠、兔都是常用的免疫動物，在實驗中，選擇動物時應考慮抗原與動物的種屬關系、抗原性質與動物種類、免疫血清的需要量、免疫血清的要求以及動物個體等因素。免疫用動物應選適齡、健壯．最好為雄性。最常用的實驗動物是家兔，一般選擇選擇年齡在6個月以上當年繁殖的♂性，體重2 ～3公斤，健康家兔三只，免疫前用金屬編號牌固定兔耳，或用染料涂沫在動物的背部，作出明確的標記。