2、細胞融合
（1）主要試劑的配制
①細胞培養基雜交瘤技術中使用的細胞培養基主要有RPMI-1640或DMEM（Dulberco Modified Eagles Medium）兩種基礎培養基，具體配制方法按廠家規定的程序，配好后過濾除菌（0.22um），分裝，4℃保存。
?不完全RPMI-1640培養基：RPMI-1640培養基原液96ml
100×L.G.溶液1ml
雙抗溶液1ml
7.5% NaHCO3溶液1-2ml
HEPES溶液1ml
?不完全DMEM培養基：DMEM 13.37g
超純水或四蒸水980ml
NaHCO3 3.7g
雙抗溶液10ml
100×L.G.溶液10ml
用1N HCl調試PH至7.2-7.4，過濾除菌，分裝4℃保存。
?完全RPMI-1640或DMEM培養基：不完全RPMI-1640或DMEM培養基80ml
小牛血清15-20ml
用于骨髓瘤細胞SP2/0和建株后的雜交瘤細胞培養。
?HT培養基：完全RPMI-1640或DMEM培養基99ml
HT貯存液1ml
?HAT培養基：完全RPMI-1640或DMEM培養基98ml
HT貯存液1ml
A貯存液1ml
②氨基喋呤（A）貯存液（100×，4×10-5mol/L）
稱取1.76mg氨基喋呤（Aminopterin MW 440.4），溶于90ml超純水或四蒸水中，滴加1mol/L NaOH 0.5ml中和，再補加超純水或四蒸水至100ml。過濾除菌，分裝小瓶（2ml/瓶），-20℃保存。
③次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷（HT）貯存液（100×，H：10-2mol/L，T：1.6×10-3mol/L）
稱取136.1mg次黃嘌呤（Hypoxanthine，MW 136.1）和38.8mg胸腺嘧啶核苷（Thymidine，MW
242.2），加超純水或四蒸水至100ml，置45-50℃水浴中使完全溶解，過濾除菌，分裝小瓶（2ml/瓶），-20℃凍存。用前可置37℃加溫助溶。
④L-谷氨酰胺（L.G.）溶液（100×，0.2mol/L）
稱取2.92g L-谷氨酰胺（L-glutamine，MW 146.15），用100ml不完全培養液或超純水（或四蒸水）溶解，過濾除菌，分裝小瓶（4-5ml/瓶），-20℃凍存。
⑤青、鏈霉素（雙抗）溶液（100×）
取青霉素G（鈉鹽）100萬單位和鏈霉素（硫酸鹽）1g，溶于100ml滅菌超純水或四蒸水中，分裝小瓶（4-5ml/瓶），-20℃凍存。