氣相色譜質譜法測定動物組織中的β2興奮劑含量

摘要：應用氣相色譜-質譜(GC-MS) 聯用技術建立動物組織中β2-興奮劑的測定方法。動物組織加1%的高氯酸溶液勻漿，用乙酸乙酯：異丙醇(6∶4)萃取，經固相萃取柱凈化，BSTFA+1% TMCS衍生后進行GC-MS 測定。樣品中最低檢出濃度分別為特布他林0.5μg/kg、克倫特羅110 μg/kg、沙丁胺醇0.2 μg/kg。

1.色譜條件

色譜柱：HP-5MS 5%苯基甲基聚硅氧烷彈性石英毛細管柱( 30m ×0.25mm ×0.25 μm)；進樣口溫度：300℃；柱溫程序：初溫150℃，保持3 min，然后以10℃/min 升至240℃，保持1 min ，再以20℃/min 升至 280℃，保持3 min；載氣：高純氦氣 (99.999 %)，流速110 ml/min，不分流進樣。

2.質譜條件

EI 源，源溫230℃；電子能量70 eV；接口溫度280℃，電子倍增器電壓1388 V，質譜掃描范圍50～550amu；溶劑延遲：8 min。

3.樣品處理

稱取5.0 g 經過絞碎樣品，加1%高氯酸溶液30 ml，在高速組織勻漿機中勻漿1 min，然后在80℃下超聲15 min，在5000 r /min下離心10 min，上清液移至分液漏斗中，用50%氫氧化鈉調節至堿性，加30 ml 有機溶劑振蕩提取，離心，有機相移入磨口具塞三角瓶中，重復提取一次，合并有機相，通過無水硫酸鈉，在50℃下旋轉蒸發至干。先用3 ml乙腈與3 ml正己烷溶解移入試管，混勻后分出正己烷相，乙腈相蒸干后用3%乙醇/乙酸乙酯溶解定容至2 ml 。取Cle-SLX 柱先用 5ml 3% 乙醇/乙酸乙酯淋洗 ，然后加1 ml 樣品提取液， 加5 ml 5%甲醇/乙酸乙酯淋洗收集得組分1，然后用10 ml 50%甲醇/乙酸乙酯淋洗液收集得組分2，洗脫液分別用氮氣吹干。加100 μl BSTFA+1%TMCS，在60℃下衍生30 min，氮氣吹干，加200 μl 甲苯溶解離心，取110 μl 進行GC/ MS 分析。