液相色譜壓力偏高之故障排查

　　壓力是液相色譜系統中非常重要的技術指標，我們在使用液相色譜的過程中，經常會遇到系統壓力偏高，甚至出現超過系統最大耐壓而報錯的現象。出現這種現象通常的問題就是“堵”了，堵的位置可能是在線過濾器、保護住或色譜柱、進樣器或檢測器的流通池。如果堵了，需要先確定是保護柱或色譜柱堵了還是系統堵了，可以按照流動相的流路依次分段排查。

　　排查色譜柱

　　 首先排查是否是色譜柱或保護柱堵了，可以將保護柱卸下，如果壓力正常，說明是保護柱堵了，需要更換保護柱或保護柱柱芯。將色譜柱的出口斷開，如果壓力依然很高，再將色譜柱卸下，如果壓力很小，說明是色譜柱堵了，需要對色譜柱進行沖洗或更換。

　　 如果經過排查不是色譜柱或保護柱的原因，則很有可能是系統堵了，需要按照流動相的流路依次排查。

　　排查在線過濾器

　　 在排查保護柱的時候， 將保護柱卸下，并斷開流路，如果壓力偏高，則很有可能是在線過濾器堵了。或者，在流動相灌注的時候，系統壓力偏高，則很有可能是在線過濾器堵了，需要對在線過濾器進行清洗。

　　排查進樣部位

　　 對于華譜S3000液相色譜儀，采用的是針在線直接進樣方式，如果在平衡色譜柱的時候系統壓力正常，進樣后系統壓力偏高，則很有可能是進樣針或針座堵了，需要對進樣部位進行清洗和維護。

　　排查流通池

　　 將檢測器入口接頭斷開，如果壓力恢復正常，說明很有可能是流通池堵了，需要對流通池進行清洗維護。

　　【引起“堵”的因素——樣品】

　　 引起液相色譜堵的原因大多是樣品、流動相或緩沖鹽使用不當引起的。經過前處理的樣品一定要經過微孔濾膜過濾后再進行色譜進樣，而且在選擇微孔濾膜的時候一定要根據樣品溶劑選擇有機系、水系或者其他類型的濾膜。

　　【引起“堵”的因素——純水】

　　 液相使用的純水最好是“現用現配“，新制備的純水在實驗室放置幾天就會長菌，雖然這些細菌用肉眼觀察不到，但卻很容易進入系統及色譜柱的孔隙，造成堵塞。

　　【引起“堵”的因素——有機溶劑】

　　 使用的甲醇、乙腈及其他有機溶劑最好是購買色譜純的，雖然市售有很多國產的色譜純試劑，但質量也是參差不齊，所以在購買前要進行合理的評估。如果有機相需要和水進行混合，則在混合后要進行過濾。雖然純有機溶劑不容易滋生細菌，但是裝入流動相瓶的純有機溶劑不建議放置時間太長，超過三個月需要進行更換。

　　【引起“堵”的因素——緩沖鹽】

　　 配制好的緩沖鹽溶液一定要先用0.22μm的微孔濾膜進行過濾。使用完緩沖鹽溶液時，及時用純水將管路中緩沖鹽置換出去，再以高比例的水相沖洗色譜柱。由于緩沖鹽是用純水配制的，所以放置時間長很容易滋生細菌，所以緩沖鹽溶液一般不建議一次配制后長時間使用。有些實驗員為了節約時間，一次配制很多緩沖鹽溶液，過濾后放置于冰箱中隨用隨取，這樣低溫下很容易有緩沖鹽析出，從而堵塞色譜系統。

　　絕大多數的色譜故障是人為因素引起的，所以在使用液相色譜的時候一定要養成良好的使用習慣，做好平常的維護保養，可以有效降低儀器故障率，延長儀器的使用壽命。