液相色譜的發展變化介紹

液相色譜色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法（正相與反相）、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。

    1、液固色譜法

    使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附－解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5~10μm。適用于分離分子量200~1000的組分，大多數用于非離子型化合物，離子型化合物易產生拖尾。常用于分離同分異構體。

    2、液相色譜法

    使用將特定的液態物質涂于擔體表面，或化學鍵合于擔體表面而形成的固定相，分離原理是根據被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是一個分配平衡過程。涂布式固定相應具有良好的惰性；流動相必須預先用固定相飽和，以減少固定相從擔體表面流失；溫度的變化和不同批號流動相的區別常引起柱子的變化；另外在流動相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復雜化。由于涂布式固定相很難避免固定液流失，現在已很少采用。現在多采用的是化學鍵合固定相，如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。

    液相色譜法的分離機理是基于混合物中各組分對兩相親和力的差別。根據固定相（柱子里裝的填料）的不同，液相色譜分為液固色譜、液液色譜和鍵合相色譜。

    根據固定相的整體外觀形式，液相色譜法可以分為柱色譜法、紙色譜法及薄層色譜法。

    按樣品與固定相的作用力，可分為吸附色譜、分配色譜、親和色譜、疏水色譜、離子交換色譜和凝膠滲透色譜等。

    在液相柱色譜系統中加上高壓液流系統，使流動相在高壓下快速流動，以提高分離效果，因此出現了高效（又稱高壓）液相色譜（HPLC)法。

    液固色譜，其固定相是一些具有吸附活性的物質如硅膠、氧化鋁、分子篩、聚酰胺等。

    液相色譜的發展，涉及鍵合相，基于被測物質在固定相（含液體）和流動相之間的相對溶解度的差異，通過溶質在兩相之間進行分配以實現分離。將固定液機械地涂漬在擔體上組成固定相。化學鍵合固定相。這種固定相是通過化學反應把各種不同的有機基團鍵合到硅膠（載體）表面的游離羥基上，代替機械涂漬的液體固定相。這不僅避免了液體固定相流失的困擾，還大大改善了固定相的功能，提高了分離的選擇性，化學鍵合色譜適用于分離幾乎所有類型的化合物。