液相色譜系統的日常維護及注意事項（之二）

　　流動相使用的注意事項必須使用HPLC級或相當于該級別的流動相，并要先經0.45μm薄膜過濾。過濾后的流動相必須經過充分脫氣，以除去其中溶解的氣體（如02），如不脫氣易產生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無法分析。

　　幾種脫氣方法比較：

　　1、 氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續吹氦脫氣，效果較好但成本高。

　　2、 加熱回流法：效果較好，但操作復雜，且有毒性揮發污染。

　　3、 抽真空脫氣法：易抽走有機相

　　4、 超聲脫氣法：一種較為常見的脫氣法。流動相放在超聲波容器中，用超聲波震蕩10~15 分鐘，此法效果并不太好但操作簡單。如果管路中使用peek樹脂部件，請不要使用下列流動相：濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜

　　特別注意HPLC使用過后的系統清洗：含有緩沖鹽溶液的流動相的清洗方法：

　　1、 先用100%的純水沖洗，打開排放閥，用3~5ml/min的流量，洗二十分鐘左右后停泵。此舉主要是針對吸液系統、泵頭、進出口單向閥等體積較大的空間的清洗

　　2、 再用95：5的甲醇/水清洗整個系統，關閉排放閥，用1ml/min的流量，洗30~60分鐘后停泵。此舉主要是用水清洗整個系統中的鹽，用5%的甲醇主要是為了保護色譜柱。

　　3、 最后用100%的甲醇清洗整個系統，用1ml/min的流量，洗2分鐘左右，然后關機。如果流動相中不含鹽，則使用上述第三步清洗即可。