收集皮膚炭疽的膿液、滲出物，吸入性炭疽的咯痰，腸炭疽的糞便以及病人的的血液等送檢，獸尸禁止解剖，可割取耳朵或舌尖一片送檢。
將標本直接涂片，沙黃莢膜染色鏡檢，觀察形態及莢膜特征，可以初步幫助診斷，確診應進行血平板分離培養，37℃孵育12～15小時，鉤取可疑菌落，進行青霉素串珠試驗，噬菌體裂解試驗，碳酸氫鈉平板二氧化碳培養。莢膜腫脹試驗和小白鼠致病力試驗等與其他需氧芽胞桿菌進行鑒別確定。
