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    發布時間:2019-03-30 15:56 原文鏈接: 細胞色素P450的光譜測定——比色法

    實驗材料

    肝微粒體蛋白

    試劑、試劑盒

    磷酸緩沖液Tris緩沖液蒸餾水

    儀器、耗材

    試管試管架比色池雙光速分光光度計微量注射器針頭單光束紫外分光光度計

    細胞色素P450(cytochromeP450或CYP450,簡稱CYP450)為一類亞鐵血紅素—硫醇鹽蛋白的超家族,它參與內源性物質和包括藥物、環境化合物在內的外源性物質的代謝。

     

    細胞中,細胞色素P450主要分布在內質網和線粒體內膜上,作為一種末端加氧酶,參與了生物體內的甾醇類激素合成等過程。近年來,對細胞色素P450的結構、功能特別是對其在藥物代謝中的作用的研究有了較大的進展。最新研究表明細胞色素P450還是藥物代謝過程中的關鍵酶,而且對細胞因子和體溫調節都有重要影響。

     

    CYP參與藥物代謝的總反應式可用式表達:

    DH+NADPH+[H+]+O2→DOH+H2O+[NADP+]

     

    含鐵離子的P450與藥物分子結合,接受從NADPH—P450還原酶傳遞來的一個電子,使鐵轉變為二價亞鐵離子;隨之與一分子氧、一個質子、第二個電子結合,形成Fe2+OOH●DH復合物,它與另一個質子結合,產生水和鐵氧復合物(FeO)3+●DH。(FeO)3+●與氫原子(來自DH)分離,形成一對短暫的自由基,氧化型藥物從復合物中釋放,P450酶再生。

     

    CYP在哺乳動物主要存在于微粒體和線粒體中。已發現幾乎1000種CYP廣泛分布于各種生物機體內,在生理上有功能意義的就有約50種,根據氨基酸序列的統一性分為17個家族和許多亞家族。氨基酸序列有40%以上相同者劃為同一家族,以阿拉伯數字表示;同一家族內相同達55%以上者為一亞家族,在代表家族的阿拉伯數字之后標以英文字母表示;在同一亞家族的當同工酶則再以阿拉伯數字表示。

     

    在寫法上,CYP表述酶蛋白或mRNA,cyp則表示編碼酶蛋白的基因。


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