細胞表面抗原檢測實驗

HeLa細胞

1640培養液 小牛血清 甲醛固定液 PBS 液體石蠟

蓋片 載片 培養瓶 培養皿 濾紙 鑷子 吸管 倒置顯微鏡 熒光顯微鏡 微量加樣器

1.  將培養瓶中的結腸癌細胞接種到裝有蓋片的培養皿中，培養2~3天。

2.  在倒置鏡下觀察到蓋片上的細胞生長狀態良好后，在蓋片左上角用玻璃筆做一下標記，以免在以后的操作中正反面顛倒。

3.  將蓋片放在甲醛固定液中，4℃固定5~10分鐘。

4.  用PBS洗三次，注意不要將PBS液直接倒在蓋片的細胞面，以免引起細胞大量丟失。用濾紙片將蓋片上的PBS輕輕吸干，不要損傷細胞層。

5.  將已稀釋好的小鼠抗體滴在蓋片上．每個蓋片50 ul，37℃溫育30分鐘。

6.  用PBS洗三次，濾紙吸干。

7.  將已稀釋好的熒光標記羊抗鼠二次抗體5ul滴加在蓋片上，37℃溫育30分鐘。

8.  用PBS洗三次，濾紙吸干。

9.  將載片上滴一滴液體石蠟。然后將蓋片細胞面朝下放到載玻片上，在熒光顯微鏡下觀察。