膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑,使金離子還原為金原子,可用于制備膠體金的還原劑有 50 余種,但在生物醫學領域內最為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等,因此將重點介紹這三種還原劑制備膠體金分散顆粒的具體方法和步驟。
| 實驗方法原理 | 白磷還原法的建立已有近百年的歷史,由于此法操作較為簡便,制備出來的膠體金顆粒大小較一致,因而應用較為廣泛,現以 Faulk 和 Taylor(1971)的報道為基礎介紹這一方法。 |
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| 試劑、試劑盒 | |
| 實驗步驟 | 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2CO3 1.2 ml,加入 120 ml 雙蒸水。 2. 上述溶液充分攪拌混勻 3 min 以上。 3. 在攪拌條件下將 1 ml 新鮮配制的 20% 飽和白磷乙醚溶液加入上述混合液中,約在 5 min 內溶液變為棕紅色。 4. 將上述混合液加熱煮沸,直至變成鮮明的橙紅色為止,一般約需 10 min。橙紅色的出現表明氯化金的還原反應終止,膠體金制備成功。按上述法制備的金顆粒直徑為(5.6±0.9)nm。 |