臍血來源多能祖細胞的凍存與復蘇實驗_CBMNCs凍存

CB-MNCs

FBS二甲基亞砜（DMSO)

凍存管慢速冷凍盒（如Mr.Frosty程序降溫盒）或控速降溫儀耐液氮儲存盒

(a)準備凍存液：90%FBS+10%DMSO;放冰上或4℃冰箱冷卻，至少30min。

(b)CB-MNCs細胞計數。

(c)用冷的凍存液重懸細胞，調整細胞濃度為（5?l0) ×10⁶活細胞/mL。

(d)按1mL/凍存管分裝。

(e)立即將凍存管放入慢速冷凍盒，置于-70℃冰箱4?24h。或者將凍存管放入液氮的控速降溫儀中。

(f)4?24h后，將置于-70℃冰箱或控速降溫儀中的凍存管放入耐液氮儲存盒，將此盒放入液氮罐的氣相（大約-135℃)或液相（大約-196℃）中。