(1)培養基的厚度對抑菌圈的大小有影響，故平皿中加入培養基要固定，以4mm深度為宜。制備的平板使用時應放于35℃溫箱中30min去除過多的水分，以免影響抗菌藥物的擴散。
(2)接種細菌后應在室溫放置片刻，待菌液被培養基吸收后，再貼紙片;但不宜放置太久，否則在貼紙片前細菌已開始生長可使抑菌圈縮小。
(3)培養溫度為35℃為宜。堆放試驗平板不超過兩個，使其受熱均勻。
(4)測量抑菌量應仔細，從生長刺激帶測量。
