微生物具有容易變異的特性，因此，在保藏過程中，必須使微生物的代謝處于最不活躍或相對靜止的狀態，才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。選用優良菌株，根據生理生化特征隔絕空氣使其處于休眠狀態或者代謝處于最低的狀態，生長繁殖受抑制從而降低變異率。
此法實用而效果好。霉菌、放線菌、芽孢細菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年，一般無芽孢細菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌，在37℃溫箱內，亦可保藏3個月之久。此法的優點是制作簡單，不需特殊設備，且不需經常移種。缺點是保存時必須直立放置，所占位置較大，同時也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養物移種后，接種環在火焰上燒灼時，培養物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺，應特別注意。
細菌酵母菌放線菌霉菌
肉膏蛋白胨斜面培養基液體石蠟滅菌水
三角燒瓶棉塞牛皮紙溫箱滅菌鍋吸管
一、將液體石蠟分裝于三角燒瓶內，塞上棉塞，并用牛皮紙包扎，1.05 kg/cm2，121.3℃滅菌30分鐘，然后放在40℃溫箱中，使水汽蒸發掉，備用。
二、將需要保藏的菌種，在最適宜的斜面培養基中培養，使得到健壯的菌體或孢子。
三、用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟，注入已長好菌的斜面上，其用量以高出斜面頂端1 cm為準，使菌種與空氣隔絕。
四、將試管直立，置低溫或室溫下保存（有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間還要長）。
