實驗目的
1、了解旋光儀的構造和旋光度的測定原理
2、掌握旋光儀的使用方法和比旋光度的計算方法
預習要求
理解定義；了解影響因素；了解測定意義；了解碳水化合物的變旋光現象；思考本實驗中如何保護旋光儀。
實驗原理
當一束單一的平面偏振光通過手性物質時，其振動方向會發生改變，此時光的振動面旋轉一定的角度，這種現象稱為旋光現象。物質的這種使偏振光的振動面旋轉的性質叫做旋光性，具有旋光性的物質叫做旋光性物質或旋光物質。許多天然有機物都具有旋光性。由于旋光物質使偏振光振動面旋轉時，可以右旋（順時針方向，記做“+”）,也可以左旋（逆時針方向，記做“—”），所以旋光物質又可分為右旋物質和左旋物質。
由單色光源（一般用鈉光燈）發出的光，通過起偏棱鏡（尼可爾棱鏡）后，轉變為平面偏振光（簡稱偏振光）。當偏振光通過樣品管中的旋光性物質時，振動平面旋轉一定角度。調節附有刻度的檢偏鏡（也是一個尼可爾棱鏡），使偏振光通過，檢偏鏡所旋轉的度數顯示在刻度盤上，此即樣品的實測旋光度α。
儀器和試劑
旋光儀、洗瓶、膠頭滴管、濾紙；
蒸餾水、5%葡萄糖溶液、未知濃度的葡萄糖溶液
實驗內容
1．旋光儀的結構
旋光度可以由旋光儀來測定。旋光儀有兩種：一種是數字自動顯示測定結果的自動旋光儀，另一種是目測刻度而得結果圓盤旋光儀。
2．旋光度的測定
（1）樣品溶液的配制
準確稱取一定量的樣品，在50ml的容量瓶中配成溶液。通常可以選用水、乙醇、氯仿作溶劑。若用純液體樣品直接測試，則測定前只需確定其相對密度即可。
由于葡萄糖溶液具有變旋光現象，所以待測葡萄糖溶液應該提前24小時配好，以消除變旋光現象，否則測定過程中會出現讀數不穩定的現象。
（2）預熱
打開旋光儀電源開關，預熱5～10分鐘，待完全發出鈉黃光后方可觀察使用。
（3）調零
在測定樣品前，必須先用蒸餾水來調節旋光儀的零點。洗凈樣品管后裝入蒸餾水，使液面略凸出管口。將玻璃蓋沿管口邊緣輕輕平推蓋好，不要帶入氣泡，旋緊（隨手旋緊不漏水為止，旋得太緊，玻片容易產生應力而引起視場亮度發生變化，影響測定準確度）上螺絲帽蓋。將樣品管擦干后放入旋光儀，合上蓋子。開啟鈉光燈，將刻度盤調在零點左右，會出現大于或小于零度視場的情況。如圖10-3中a和b所示。旋動粗動、微動手輪，使視場內三部分的亮度一致，即為零點視場，如圖10-3c所示。記下刻度盤讀數，重復調零4~5次取平均值。若平均值不為零而存在偏差值，應在測量讀數中將其減去或者加上。
a.大于或小于零度視場 b.零度視場 c.小于或大于零度視場
（4）測定
樣品的測定和調零方法相同。每次測定之前樣品管必須先用蒸餾水清洗1~2遍，再用少量待測液潤洗2～3次遍，以免受污物的影響，然后裝上樣品進行測定。旋動刻度盤，尋找較暗照度下亮度一致的零度視場。若讀數是正數為右旋；讀數是負數為左旋。讀數與零點值之差，即為樣品在測定溫度時的旋光度。記下測定時樣品的溫度和樣品管長度。測定完后倒出樣品管中溶液，用蒸餾水把管洗凈，擦干放好。
按以上方法測定5%葡萄糖溶液的旋光度4~5次，測定值填入下表相應位置。再測定未知濃度的葡萄糖溶液的旋光度4~5次，測定值填入下表相應位置。
（5）數據記錄與處理
按表中設計的項目進行相應處理，最終求出未知濃度葡萄糖溶液的濃度。
