酶促反應速度的測定可采用兩種方式：
一、測定完成一定量反應所需的時間；
二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法，后者稱為動力學法。
終點法
該方式是在特定條件下，將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物，然后根據反應進行到某一程度（即達到某一指標）所需要的時間長短來估計酶的活力。
其一個發展是采用檢測器對反應進行連續跟蹤，并在反應達到某一程度時，精確地自動記錄所需要的時間，這就是酶分析自動化中的固定濃度法；另一個發展是作成簡便的酶檢測紙片。
動力學法
該方式測定原理是：在一定條件下，酶促反應速度和酶濃度成正比，因此測得反應速度就需要求得酶濃度。待測的酶濃度是影響反應速度的唯 一 因素，其他因素都應處于最適于酶發揮催化作用的水平，為此應選擇適宜的底物濃度、緩沖體系、溫度，并向反應系統中添加必要的輔助因子。