革蘭氏陽性菌是能夠用革蘭氏染色染成深藍或紫色的細菌，相反革蘭氏陰性菌不能被染色。它們細胞壁中含有較革蘭氏陽性細菌大量的肽聚糖，但經常缺乏革蘭氏陰性菌所擁有的第二層膜和脂多糖層。
革蘭氏陽性菌包含細菌中的一個大門——厚壁菌門(Firmicutes)，包括一些著名的屬，如芽孢桿菌(Bacillus)、李斯特氏菌(Listeria)、葡萄球菌(Staphylococcus)、鏈球菌(Streptococcus)、腸球菌(Enterococcus)和梭菌(Clostridium)。此外厚壁菌門還包括了柔膜菌綱(Mollicutes)，如支原體(Mycoplasma)，它們不能被革蘭氏法染色，但與這些革蘭氏陽性種類相關。