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    發布時間:2020-02-16 22:18 原文鏈接: 34招教你學會實驗室常用貯存液的配制(一)

      古人云:“常在河邊走哪有不濕鞋?”一不小心:“哎?那個**溶液怎么配來著?”別擔心小析姐整理好各種溶液的配置方法,記得收藏噢。一起來看下吧。

      1 30%丙烯酰胺溶液

      『配制方法』

      將29g丙烯酰胺和1g N,N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中. 加熱至37℃溶解之,補加水至終體積為100ml.用0.45μm孔徑濾器過濾除菌,查證該溶液的pH值應不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫。

      〖注意〗

      丙烯酰胺具有很強的神經毒性并可以通過皮膚吸收,其作用具累積性. 稱量丙烯酰胺和亞甲雙丙烯酰胺時應戴手套和面具. 可認為聚丙烯酰胺無毒,但也應謹慎操作. 因為它還可能會含有少量未聚合材料. 有些價格較低的丙烯酰胺和雙丙烯酰胺通常含有一些金屬離子,在丙烯酰胺貯存液中加入大約0.2體積的單床混合樹脂(MB-1Mallinckrodt),攪拌過夜,然后過濾以純化之(建議使用Whatman 1號濾紙過濾,鴻躍公司有售). 在貯存期間,丙烯酰胺和雙丙烯酰胺會緩慢轉化成丙烯酰和雙丙烯酸.

      2 40%丙烯酰胺

      『配制方法』

      把380g丙烯酰胺(DNA測序級)和20g N,N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為600ml的蒸餾水中. 繼續按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法處理,但加熱溶解后應以蒸餾水補足至終體積為1L.

      〖注意〗

      見上述配制30%丙烯酰胺的說明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列測定.

      3 放線菌素D溶液

      『配制方法』

      把20mg放線菌素D溶解于4ml 100%乙醇中,1:10稀釋貯存液,用100%乙醇作空白對照讀取OD440值. 放線菌素D(分子量為1255)純品在水溶液中的摩爾消化系數為21,900,故而1mg/ml的放線菌素D溶液在440nm處的吸光值為0.182,放線菌素D的貯存液應放在包有箔片的試管中,保存于-20℃.

      〖注意〗

      放線菌素D是致畸劑和致癌劑,配制該溶液時必須戴手套并在通風櫥內操作,而不能在開放在實驗桌面上進行,謹防吸入藥粉或讓其接觸到眼睛或皮膚.

      另,藥廠提供的作治療用途的放線菌素D制品常含有糖或鹽等添加劑. 只要通過測量貯存液在440nm波長處的光吸收確定放線菌素D的濃度,這類制品便可用于抑制自身引導作用.

      4 0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液

      『配制方法』

      在0.8ml水中溶解60mg ATP,用0.1mol/L NaOH調至pH值至7.0,用蒸餾水定容1ml,分裝成小份保存于-70℃.

      5 10mol/L乙酸酰溶液

      『配制方法』

      把770g乙酸酰溶解于800ml水中,加水定容至1L后過濾除菌.

      6 10%過硫酸銨溶液

      『配制方法』

      把1g過硫酸銨溶解于終量為10ml的水溶液中,該溶液可在4℃保存數周.

      7 BCIP溶液

      『配制方法』

      把0.5g的5-溴-4-氯-3-吲哚磷酸二鈉鹽(BCIP)溶解于10ml 100%的二甲基甲酰胺中,保存于4℃.

      8 2×BES緩沖鹽溶液

      『配制方法』

      用總體積90ml的蒸餾水溶解1.07g鹽溶液BES[N,N-雙(2-羥乙基)-2-氨基乙磺酸]、1.6g NaCl和0.027g Na2HPO4,室溫下用HCl調節該溶液的pH值至6.96、然后加入蒸餾水定容至100ml,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成小份,保存于-20℃.

      9 1mol/L CaCl2溶液

      『配制方法』

      在200ml蒸餾水中溶解54g CaCl26H2O,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成10ml小份貯存于-20℃.

      〖注意〗

      制備感受態細胞時,取出一小份解凍并用蒸餾水稀釋至100ml,用Nalgene濾器(0.45μm孔徑)過濾除菌,然后驟冷至0℃.

      10 2.5mol/L CaCl2溶液

      『配制方法』

      在20ml蒸餾水中溶解13.5gCaCl26H2O ,用0.22μm濾器過濾除菌,分裝成1ml小份貯存于-20℃.


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