1、應用范圍
此ELISA試劑盒可用于人尿液中5-HIAA的體外定量檢測。
2、前言
原發性類癌瘤通常都源自中腸的腸嗜鉻細胞，并且大多情況都位于回腸末端中。類癌瘤通常都會分泌各種各樣的吲哚，此類腫瘤的一般都明顯的表現為尿液5-HIAA（五羥色胺的最終代謝產物）的分泌量升高。5-HIAA傳統的檢測方法是通過亞硝基萘酚的重氮化作用產生紫色。然而，人們已證明很多存在于尿液中的其它物質會干擾此反應而出現假陽性結果。人們也嘗試著通過將離子交換層析和熒光分析相結合的方法來克服此問題。但這些方法靈敏度低并且耗費時間。最近，有人也介紹使用下列方法來檢測5-HIAA：紫外區域5-HIAA的高效液相層析與熒光分析（或電化學分析）相結合的方法。因為尿液中存在著各種各樣的干擾復合物，所以這兩種方法都要求進行溶劑提取。而5-HIAA的酶聯免疫檢測是用于尿液中類腫瘤綜合征標記物定量檢測的一種全新的、簡單的方法。
3、實驗原理
此ELISA試劑盒利用的是競爭法原理，生物素標記抗原和未用生物素標記抗原競爭結合一定量的抗體結合位點。結合到抗體上生物素標記抗原的量與樣品中被分析物的濃度成反比。反應系統達到平衡后，未結合的生物素標記的抗原用洗滌液洗去。結合了生物素標記抗原的抗體的量的測定是以抗生物素堿性磷酸酶作為標記物，以PNPP(對硝基苯酚磷酸鹽)作為底物液。將未知物的酶反應活性和已知標準品的反應曲線相比較，可以得到未知物的量。
4、試劑盒成分
數量 | 標志 | 成分 |
1×12×8 | MTP | 包被板，可拆，微孔中包被了抗兔IgG（羊，單克隆）。 |
1×5ml | ANTISERUM | 5-HIAA 抗血清 藍色，即用，內含：抗血清（兔），磷酸緩沖液，穩定劑。 |
1×5ml | BIOTIN | 5-HIAA 生物素 即用，藍色，內含：磷酸緩沖液，穩定劑。 |
1×0.2mL | ENZCONJ CONC | 酶聯物 濃縮型（100×） 內含：堿性磷酸酶標記的抗生物素抗體（羊），Tris緩沖液，穩定劑 |
1×7×0.5ml | CAL A-G | 標準品A-G 0; 0.4; 1.0; 2.75; 7.5; 20; 55 mg/L 0; 2.1; 5.25; 14.4; 39.4; 105; 288 μmol/L 即用,內含:5-HIAA（甲基化）,穩定劑。 |
1×2×0.5ml | CONTROL 1+2 LYO | 質控品1+2，凍干粉，內含：人尿液（正常與非正常人的尿液），具體濃度及可允許范圍請見試劑瓶標簽. |
1×2ml | METHYLRAGE | 甲基化試劑，黃色，即用，內含二氯甲烷 |
1 x 1 mL | HCL | HCl，即用，0.1M的HCl |
1 x50ml | ASSAUBUF CONC | 檢測緩沖液，濃縮（10 x） 內含：磷酸緩沖液，BSA，穩定劑 |
1 x4ml | DILREAG | 稀釋液，即用，內含：N,N-二甲基甲酰氨 |
1 x50ml | WAHSBUF CONC | 洗滌液，濃縮（20 x） 內含：磷酸緩沖液，吐溫，穩定劑 |
1×9 | PNPP SUBS | PNPP底物片，內含：對硝基苯磷酸（PNPP） |
1×27ml | PNPP BUF | PNPP底物緩沖液，即用，內含：二乙醇胺，水， |
1×15ml | PNPP STOP | PNPP終止液，即用，內含：1M的NaOH，0.25M的EDTA |
3× | FOIL | 粘性金屬板 |