在Abbott Cell-DYD 1600型血細胞分析儀的應用中,血細胞分布直方圖具有直觀性,對分析病人標本和對儀器狀態及性能都很有幫助。
一,白細胞分布直方圖
電阻法白細胞計數和分類的基本原理如下:在溶血素(Lyse)的作用下,白細胞在高滲和化學作用的共同影響下,膜的透性增加,細胞內液逸出,而細胞核及細胞器卻不能通過胞膜,皺縮的膜包裹細胞核及胞質顆粒形成一個“溶血素作用后細胞”(lyse
modified cell,本文簡稱為LMC )。LMC 通過計數孔,在孔的內外有電場存在,每一個大小不同的LMC
通過電場都產生一個與其體積成正比的電脈沖,通過對收集到的脈沖信號的分析,從而計出細胞的數量,并且能夠對白細胞跟據脈沖大小的分布計算出白細胞的分類(其實是LMC
的脈沖大小)。值得注意的是,電阻法對白細胞的分類根據的是LMC 的體積,而不是根據生理狀態下的白細胞體積。LMC
與生理條件下的體積分布對照如下:
1,溶血素對各類白細胞的作用:
淋巴細胞:細胞體積小,胞核單一且較小,胞漿量少,胞質顆粒少。經溶血素作用后形成一個由胞膜緊緊裹在核上的LMC ,體積在35~98fl,CD1600在三分類上屬LYM。
嗜堿性粒細胞:細胞體積較小,胞核單一且較小,胞漿量極少,胞漿中有嗜堿性顆粒。經溶血素作用后形成一個由胞膜緊緊裹在核及上的LMC ,體積在98~135fl,CD1600在三分類上并入MID。
嗜酸性粒細胞:細胞體積較大,胞核多為兩個,胞漿量較多,胞漿有較多的粗大嗜酸性粒顆粒。經溶血素作用后形成一個由胞膜裹在核及胞質顆粒上的LMC ,體積在98~135fl,CD1600在三分類上并入MID。
單核細胞:生理狀態下,細胞體積最大,胞核單一,較大,在三維空間上有折皺,胞漿量中等,顆粒較少。經溶血素作用后形成一個由胞膜裹在核上的一個中等大小的LMC ,體積在98~135fl,CD1600在三分類上并入MID。
中性粒細胞:生理狀態下,細胞體積較大,分葉核,胞漿豐富,有大量中性顆粒。經溶血素作用后,形成一個由胞膜核及中性顆粒上的LMC ,體積在135~350fl,CD1600在三分類上屬GRAN。
白細胞分布直方圖的模式:
白細胞分布直方圖是以“溶血素作用后細胞”體積為橫軸,以數量為縱軸。橫軸分為256個通道,每通道為1.37fl,收集到的相應的脈沖數量在坐標系中描點,從而繪出一條連續的曲線。理想的白細胞曲線是由三個連續的正態分布形成的曲線。
2,白細胞的干擾“R”的分布。
類似于“R0 、R1 、R2 、R3 、R4及Rm”這樣的標記經常會出現在CD1600的報告單的WBC計數及分類的數值結果旁邊,這些R的標記是對白細胞分布中的某些區域數值異常所進行的提示。具體R的分布見下圖:
3, 白細胞分類與計數中出現的異常情況:
3.1, 中介值細胞區域出異常白細胞峰。
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3.2, 由大量白血病細胞出現形成的單一峰。
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3.3,由堵孔或半堵孔引起的干擾峰及判斷。
由于計數用的寶石孔被蛋白質塊、細胞碎片、纖維、結晶等堵塞或半堵塞,白細胞計數會出現非常嚴重的干擾,表現為白細胞總數假性增高,具體反映在直方圖上如下圖標示,而在數值上,淋巴細胞計數增高,百分比加大,高達80%以上,有R0, R1, R2, Rm提示出現。
3.3.1,出現下圖所示峰形一般再結合計數時間即可做出白細胞寶石孔堵孔的判斷。
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3.3.2 如果出現下圖所示峰形,考慮到試劑質量不高的情況下,測試嬰幼兒標本時,從直方圖及數值上不易與半堵孔的情況區別,一般也應清洗機器后復查。
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3.3 白細胞計數Count Over Range
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二,紅細胞分布直方圖
相對于白細胞的分布直方圖,紅細胞分布直方圖就顯得簡單和易于理解。同白細胞分布直方圖的原理相同,橫軸為紅細胞體積,縱軸則代表了數量。
橫軸分為256個通道,每通道為1 fl,收集到的相應的脈沖數量在坐標系中描點,從而繪出一條連續的曲線。理想的紅細胞曲線是一個正態分布的曲線。
1, 下面的圖標示了三種不同的RBC分布模式圖。通過和正常RBC分布對照,當出現小細胞或大細胞分布時,能直觀地辨別出來。
2, 下圖標示是由不同紅細胞亞群引起一比較少見的特殊峰形:
3, 下圖標示了某些情況下過高的WBC或PLT計數對紅細胞分布直方圖的干擾。
三,血小板分布直方圖
血小板分布直方圖橫軸分為256個通道,每通道為0.137 fl,收集到的相應的脈沖數量在坐標系中描點,從而繪出一條連續的曲線。
1, 血小板分布直方圖的理想模式
2, 血小板分布直方圖的干擾情況
2.1,血小板受到體積極小的紅細胞影響,會使PLT的計數假性增高。
2.2,血小板受到靜電干擾,會使PLT的計數假性增高。
2.3,血小板在高值區域受到相關因素的影響,使PLT的計數假性增高。
關于Cell-dyn 1600血細胞分析儀的細胞分布直方圖還有其它一些有用的信息,有助于我們對血常規結果有更好的理解。