
鉤狀效應(hook effect),類似于沉淀反應中抗原過剩的后帶現象。當標本中待測抗原濃度相當高時,過量抗原分別和固相抗體及酶標抗體結合,而不再形成夾心復合物,所得結果將低于實際含量。鉤狀效應嚴重時甚至可出現假陰性結果。假陰性結果可能會對患者的治療方案產生災難性的影響。恰巧我們在工作中遇到一例沒有報警的因鉤狀效應而引起的HCG假性低值,這警示著我們,雖然出現鉤狀效應的風險偏低,但實驗室應該時刻警惕著這方面的局限性。
案例
2018年6月23日晚,檢驗科接到臨床反饋,有一葡萄胎患者于19日術前檢測HCG,結果為 787.19 IU/L,23日清宮術后檢測HCG,結果為 21萬IU/L ,檢測結果與臨床癥狀不符。接到反饋后檢驗科迅速展開調查:
1、立即聯系23日值班人員將當日標本復測HCG,結果為216977 IU/L,與當日結果相符。在排除了標本采樣錯誤和檢測錯誤后,聯系臨床重新采樣進行檢測,結果相符。
2、6月24日早上抽血復查HCG,結果為11萬IU/L,符合清宮后HCG變化趨勢。故高度懷疑19日檢測結果有異常,故找出該患者19日樣本,分別以原倍模式和稀釋模式進行復測,原倍復測結果791.06 IU/L,與19日報告結果相符,但是稀釋復測結果超出檢測上限(結果值>27萬IU/L)。
以上數據說明:該患者清宮術前(19日)的血標本在原倍模式下的抗原抗體反應出現了鉤狀效應(該檢測系統原倍線性范圍較小,僅為0-1050IU/L),在抗原過剩的情況下,檢測結果出現了假性降低,但機器沒有任何報警信息。
原因分析
討論
據國外文獻報道:在6種不同型號的全自動分析儀中,對高濃度hCG樣品進行稀釋分析。結果發現,分析者的信號讀數清楚地顯示出了對Advia Centaur、Unicel DxI 800、Immulite 2000和Roche E170的鉤狀效應,在Advia Centaur和DxI 800中該信號的峰值信號大約發生在20000 IU/L,在Immulite 2000和E170上的IU/L約為300000 IU/L。相比之下,在Dimension rxl和Abbott Architect.到測試的濃度水平時,并沒有發現鉤狀效應。其都有在添加第二抗體之前的清洗步驟,這可以去除多余的抗原,從而降低鉤狀效應的可能性。然而,在這兩種分析器中,信號確實到達了一個平臺,這可能是由于抗體數量有限或信號檢測的限制[1]。
國內外皆有關于鉤狀效應的各種報道,但各實驗室皆有方法學的局限性,怎樣避免鉤狀效應也成為實驗室管理者亟待解決的問題。
由于鉤狀效應的發生具有不可預見性,避免鉤狀效應也一直是臨床實驗人員較為棘手的問題。檢驗科經過討論改進了工作流程:增加金標試紙條法進行初篩,初篩陽性的標本稀釋模式做,初篩陰性的標本原倍模式做。該流程增加了手工環節,但能有效避免因鉤狀效應產生的假陰性或假性降低的結果。