凝集素顯示糖類細胞化學實驗
凝集素(lectin)是一種無免疫原性糖蛋白,與糖的結合有一定專一性,如伴刀豆凝集素只與葡萄糖、甘露糖結合,麥胚凝集素只與 N-乙酰葡萄糖結合。并且,凝集素還可與標記物結合,如膠體金、辣根過氧化物酶等,因此可將作為檢測糖基的一種簡單而具有選擇性的探針。不過由于糖類的復雜性以及凝集素特異的相對性,凝集素顯示糖類細胞化學結果相對比較粗糙。細胞成熟過程中、腫瘤細胞或細胞發生損傷等情況下,凝集素分布情況都可發生改變。實驗材料組織樣品試劑、試劑盒凝集素-膠體金探針鋨酸實驗步驟1. 制備或購買凝集素-膠體金探針。2. 組織常規固定,游離細胞打散,組織切片切薄。3. 漂洗 3 次。4. 5~25 μg/ml 凝集素-膠體金 15~25℃ 孵育 30~60 min。5. 漂洗、鋨酸固定同常規注意事項1. 凝集素與糖的結合屬于親和細胞化學,因此可參照免疫細胞化學方法。2. 如果凝集素為生物素化的凝集素,可以用 ABC 或親和素金標記顯示。......閱讀全文
離子細胞化學實驗——鈣離子細胞化學具體方法
離子細胞化學可用來顯示細胞內離子定位分布,目前用得比較多的是顯示細胞內鈣的分布,通常需結合EDX能譜分析。細胞內鈣離子分布是高度隔室化的,形成鈣離子濃度不同的鈣池,正常情況下,細胞內胞漿、線粒體、核等部位都有鈣的分布;在大多病理情況下(如缺血、缺氧、中毒等),細胞內鈣可升高,并且進入到細胞內的鈣很多
冷凝集素的臨床實驗
1、一般認為,病毒和其他微生物感染產生的免疫反應的副產物中就有冷凝集素,但常人并不發生溶血。在慢性淋巴增生疾病、感染和腫瘤潛在發病的老年人中很可能突破常規,并出現單克隆抗體的特征(一般為K輕鏈或A輕鏈型)。2.冷凝集素效價增高主要見于原發性冷凝集素綜合征,其時效價可高達1:1000以上,而輕度增高常
免疫酶細胞化學實驗技術
免疫酶細胞化學免疫酶細胞化學是免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應存在的前提條件下,借助于酶細胞化學的手段,檢測某種物質(抗原/抗體)在組織細胞內存在部位的一門新技術:即預先將抗體與酶連結,再使其與組織內特異抗原反應,經細胞化學染色
細胞熒光化學實驗
熒光法較一般光學方法具有靈敏度高、特異性強、方法簡便等優點,因此近年來熒光組織化學特別是免疫熒光技術有了很大的發展。利用熒光技術可研究細胞內化學成分的分布與定位,研究細胞與組織中物質的吸收與轉運,進行病理鑒別以及細胞免疫等方面的研究。?當用一種波長的光(如紫外光)照射某種物質時,這種物質會在極短的時
科學家開發出基于凝集素糖類分子識別的熱泳生物傳感新方法
近日,中國科學院國家納米科學中心孫佳姝團隊聯合北京大學藥學院、中國人民解放軍總醫院第五醫學中心、北京大學口腔醫院等,開發了基于凝集素糖類分子識別的熱泳生物傳感新方法,實現了血漿中細胞外囊泡(EV)聚糖圖譜的快速、高靈敏、選擇性分析,并用于三陰性乳腺癌(TNBC)精準診斷、療效監測與預后預測。相關研究
科學家開發出基于凝集素糖類分子識別的熱泳生物傳感新方法
近日,中國科學院國家納米科學中心孫佳姝團隊聯合北京大學藥學院、中國人民解放軍總醫院第五醫學中心、北京大學口腔醫院等,開發了基于凝集素糖類分子識別的熱泳生物傳感新方法,實現了血漿中細胞外囊泡(EV)聚糖圖譜的快速、高靈敏、選擇性分析,并用于三陰性乳腺癌(TNBC)精準診斷、療效監測與預后預測。相關
細胞組分的化學反應_細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示
實驗方法原理由于不同的蛋白質分子所帶的堿性和酸性基團的數目不同,在pH值不同的溶液中,蛋白質分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下,整個蛋白質所帶負電荷多,則為酸性蛋白質;帶正電荷多,則為堿性蛋白質。據此,可將標本經三氯醋酸處理提出核酸后,用不同pH值的固綠染液分別染色,細胞內的酸性蛋白和堿性蛋白
干細胞可通過植物凝集素提純
據美國物理學家組織網9月9日(北京時間)報道,科學家首次使用植物產生的凝集素將干細胞從混合細胞中分離出來,克服了干細胞療法和研究中因為干細胞不純引發并發癥這一巨大難題。新方法應用范圍更廣、更安全且更便宜。 干細胞在基礎研究和治療包括脊髓損傷在內的很多疾病方面具有重要的應用潛力
免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗
實驗方法原理免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因此可用熒光顯微鏡或普通光學顯微鏡觀察到復合物的存在,達到檢測
免疫細胞化學技術觀察細胞成分實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 免疫細胞化學是在細胞化學技術的基礎上,吸收免疫學的理論和技術發展起來的一項技術,其基本原理是用熒光素或酶等標記物或顯色物標記特異性抗體,通過免疫學中的抗原抗體反應與細胞內的相應抗原結合,形成帶有熒光素或顯色物的抗原抗體復合物,因
關于凝集素的基本信息概述
凝集素是動物細胞和植物細胞都能夠合成和分泌的、能與糖結合的蛋白質,在細胞識別和粘著反應中起重要作用,主要是促進細胞間的粘著。凝集素具有一個以上同糖結合的位點,因此能夠參與細胞的識別和粘著,將不同的細胞聯系起來。 凝集素(Lectin)是指一種從各種植物,無脊椎動物和高等動物中提純的糖蛋白或結合
細胞組分的化學反應實驗
實驗方法原理 細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的RNA呈紅色。由此對細胞中的DNA和RNA進行定位、定性、和定量
細胞組分的化學反應實驗
Brachet反應細胞內堿性蛋白和酸性蛋白的顯示細胞內過氧化物酶的顯示過碘酸雪夫反應(PAS)實驗方法原理細胞經甲基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的DNA和RNA出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和甲基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,甲基綠染高聚分子的DNA
電鏡酶細胞化學實驗——樣品制備
目前電鏡能定位的酶主要有三類,它們是水解酶、氧化酶、轉移酶。通過電鏡酶細胞化學技術間接證明酶的存在,可定性研究細胞的標志酶,以及在正常和病理狀態下酶的改變與疾病之關系。實驗方法原理電鏡酶細胞化學反應分兩步:①細胞內酶在一定條件下與底物進行初級酶反應(形成初級產物);②應用捕捉劑與初級產物反應形成電子
免疫酶細胞化學實驗技術3
一、對照實驗 1.吸收實驗 應用尚無文獻報告的抗血清/自己制備的抗血清進行ICC染色時,需用相應的抗原吸收抗血清后,再孵育標本,判斷結果的可信性(結果應為陰性)。常用的吸收實驗分固相吸收和液相吸收兩種(見本書第一章 ),對于不能形成沉淀,難以用離心沉降法分離的一些小分子多肽類抗原,以固相吸收為佳
免疫酶細胞化學實驗技術4
三、ICC在細胞功能研究中的應用 形態學研究目的之一是揭示組織細胞結構特征及其功能意義。利用ICC顯示給與細胞增殖標記物,是組織細胞學研究中形態和功能相結合的重要手段之一。目前常用的細胞增殖標記物有4種,Brdu (5—bromo—2--deoxyuridine), DNA polymerase
免疫酶細胞化學實驗技術2
(四)染色原理及步驟 1.基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同,亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上,間接法是將酶標記在第二抗體上,檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體(80%~90%的抗血清系由家兔制得,而絕大數單克隆
糖類的結構
主要由碳、氫、氧三種元素組成,是多羥基醛或多羥基酮及其縮聚物和某些衍生物的總稱。糖類化合物包括單糖、單糖的聚合物及衍生物。葡萄糖是單糖。麥芽糖、蔗糖、乳糖是二糖。單糖是多羥醛或多羥酮及他們的環狀半縮醛或衍生物,帶有多個羥基的醛類或者酮類。多糖則是單糖縮合的多聚物。
糖類的結構
主要由碳、氫、氧三種元素組成,是多羥基醛或多羥基酮及其縮聚物和某些衍生物的總稱。 糖類化合物包括單糖、單糖的聚合物及衍生物。葡萄糖是單糖。麥芽糖、蔗糖、乳糖是二糖。[1] 單糖是多羥醛或多羥酮及他們的環狀半縮醛或衍生物,帶有多個羥基的醛類或者酮類。多糖則是單糖縮合的多聚物。
自由基顯示實驗
實驗方法原理 實驗材料 組織樣品試劑、試劑盒 鈰生理溶液生理溶液多聚甲醛鋨酸實驗步驟 1. 組織取下后,立即在含 1 mmol/L 鈰生理溶液中切成小塊,孵育 5 min。2. 生理溶液漂洗 5 min。3. 4% 多聚甲醛固定、漂洗。4. 鋨酸后固定、脫水、包埋等同常規。5. 電鏡觀察。
異顯示技術(DD)實驗
D D?由?Liang和?Pardee在 1992年首次提出。至今有大約1700篇 與?DD相關的文章發表,可見其影響巨大。許多與神經變性和凋亡相關的基因也通過DD?的方法得以鑒定。 .DD的原理基于對cDNA分子進行隨機擴增和隨后按大小進行的分離。為此,首先需分離靶細胞或組織中總RNA,反轉錄為c
自由基顯示實驗
H2O2細胞化學法 細胞化學法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 組織樣品
差異顯示技術(DD)實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 無菌玻璃器皿 無菌 Eppendorf試 管 Eppendorf槍頭 無菌 falcon離心管 試劑、試
腫瘤干細胞抑制劑顯示早期療效,化學結構令人擔憂
【新聞事件】:昨天大日本住友旗下 Boston Biomedical 宣布將在今年的 ASCO 年會上公布 11 個有關他們兩個腫瘤干細胞抑制劑 napabucasin 和 amcasertib 的早期臨床結果。據稱這兩個藥物與化療聯用在早期臨床試驗中可以以較高比例控制包括肺癌、胰腺癌、結直腸癌
溶解受體的凝集素親和層析實驗
試劑、試劑盒 麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素(受體級)豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材 一次性小型塑料柱實驗步驟 材料與設備麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖(~2.5 ml 沉積的微球)(Vector Laborat
溶解受體的凝集素親和層析實驗
溶解受體的凝集素親和層析實驗 ? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖 溶解的胰島素受體
溶解受體的凝集素親和層析實驗
本實驗介紹關于溶解受體的凝集素親和層析過程。本實驗來源于蛋白質純化與鑒定實驗指南,作者:朱厚礎。試劑、試劑盒麥胚凝集素(WGA)-瓊脂糖溶解的胰島素受體牛血清白蛋白[125I] 胰島素(受體級)豬胰島素牛γ-球蛋白聚乙二醇 6000溶液 D溶液 E結合緩沖液儀器、耗材一次性小型塑料柱實驗步驟材料與設
親和組織化學染色方法之凝集素法
①直接法:將標志物直接結合在凝集素上,使其與組織細胞相應的糖蛋白或糖脂相結合; ②間接法:先將凝集素與組織細胞膜糖基結合,然后再用標記的抗凝集素抗體(即用凝集素免疫動物制備抗凝集素抗體)與結合在細胞上的凝集素反應。間接法還有糖-凝集素-糖法,該方法是利用生物細胞膜的特殊糖基與凝集素結合后,再用
臨床化學檢查方法介紹血清冷凝集素試驗
血清冷凝集素試驗介紹: 冷凝集素試驗,就是將人紅細胞和待測血清混合置于0-4℃低溫條件下,觀察紅細胞是否凝集。血清冷凝集素試驗正常值: 效價低于1:32。血清冷凝集素試驗臨床意義: 冷凝集素試驗結果升高,見于冷凝集素綜合征、支原體肺炎、傳染性單核細胞增多癥、瘧疾、多發性骨髓瘤、淋巴瘤等。 特
血液的化學檢驗項目血清冷凝集素試驗
血清冷凝集素試驗介紹: 冷凝集素試驗,就是將人紅細胞和待測血清混合置于0-4℃低溫條件下,觀察紅細胞是否凝集。血清冷凝集素試驗正常值: 效價低于1:32。血清冷凝集素試驗臨床意義: 冷凝集素試驗結果升高,見于冷凝集素綜合征、支原體肺炎、傳染性單核細胞增多癥、瘧疾、多發性骨髓瘤、淋巴瘤等。 特