elisa實驗原理是什么

elisa實驗原理是將一定濃度的抗原或者抗體通過物理吸附的方法固定于聚苯乙烯微孔板表面，加入待檢標本，通過酶標物顯色的深淺間接反映被檢抗原或者抗體的存在與否或者量的多少。

ELISA技術作為免疫標記技術（包含免疫熒光技術，免疫放射技術，免疫酶技術和免疫膠體金技術）中的一種，已廣泛應用于科研和臨床實驗中，具有快速、定性或者定量甚至定位的特點。

ELISA可用于測定抗原，也可以測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑：固相的抗原或抗體、酶標記的抗原或抗體和酶作用的底物。

根據試劑的來源和標本的性狀以及檢測的具備條件，可設計出各種不同類型的檢驗方法。

檢測方法

一、雙抗體夾心法

該方法適用于測定二價或二價以上的大分子抗原，不適用于測定半抗原及小分子單價抗原，因其不能形成兩位點夾心。

二、競爭法

該方法一般用來檢測具有較少表位的小分子物質，當然，這種方法也可以用來檢測大分子抗原物質甚至是抗體。檢測大分子抗原物質時，由于空間位阻的影響，使得該檢測方法沒有雙抗體夾心法檢測大分子抗原物質靈敏度高。

三、間接法測抗體

本法只要更換不同的固相抗原，可以用一種酶標抗體檢測各種與抗原相應的抗體。主要用于對病原體的檢測而進行傳染病的診斷。

四、雙抗原夾心法測抗體

雙抗原夾心法與間接法都可以對抗體進行檢測。

五、捕獲法測抗體

將抗IgM抗體包被于固相微孔板，用無關蛋白載體對未結合位點進行封閉后，加入待測樣本，接著加入抗原物質，然后加入針對該抗原的經生物素標記的特異性抗體和HRP標記的鏈霉親和素，經TMB底物顯色和終止反應后即可計算濃度。