1)Jaffe反應法:測定肌酐最常用的方法是尿、血清中的肌酐與苦味酸鹽作用,生成黃紅色的苦味酸肌酐復合物。此法的缺點是特異性不高,維生素C、丙酮酸、丙酮、葡萄糖、乙酰醋酸、果糖、氨基馬尿酸、蛋白質、胍基醋酸酰胺及許多化合物也能與堿性苦味酸鹽生成紅色。這些不是肌酐而能起反應的物質稱為假肌酐,相當數量的假肌酐存在于紅細胞中,故在測定血液肌酐時用血清和血漿較好。
為去除假肌酐的影響,現在常用速率法來測定血肌酐。速率法亦稱動力學方法,它是根據肌酐與堿性苦味酸形成復合物的速度與假肌酐不同,且肌酐的反應速度與濃度成正比的原理。如乙酰乙酸在20s內已與堿性苦味酸反應完成,其他多數干擾物則在80s后才與苦味酸有較快的反應,而20-80s之間主要是肌酐的反應。因此,血清與苦味酸混合后,分別讀取510nm在20s及80s時的吸光度Ao和At,At-Ao除以間隔時間的值與肌酐濃度成正比,借標準液與樣品同樣測定即可求取樣品中的肌酐量。現在速率法逐漸成為常規分析法,因為它不需去蛋白,方法簡單、快速,可自動扣除血清及試劑空白吸光度。