高效液相色譜法中硅膠鍵合柱的清潔和再生
再生被污染 HPLC 柱子的關鍵是知道污染物的性質并且能找到適當的溶劑來去除。如果污染是因為重復進樣時強保留物質的累積引起的,利用簡單的步驟來除去這些污染物往往能恢復其色譜行為。有時候,經過多次操作以后的色譜柱用 90~100%的溶劑 B(雙溶劑反相系統中較強的溶劑)沖洗 20 個體積可以清除污染物。 例如,柱子中殘留的脂質就能用非水溶劑如甲醇、乙晴、四氫 呋喃。 如果你使用的是緩沖液系統,不要直接切換到強溶劑,突然轉換到高濃度有機溶劑可能會使 HPLC 流動體系中的緩沖液沉淀,這樣會導致更大的問題如柱頭 堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞損傷或進樣閥轉軸失靈。應該先用無緩沖流動相(即把緩沖液換成水)。沖洗 5~10 個體積以后才更換強溶劑。 有時候,強溶劑也沒法把殘留在色譜柱上的污染物洗掉。那么更強的溶劑或者是一系列溶劑就有必要用來清洗柱子......閱讀全文
高效液相色譜法中硅膠鍵合柱的清潔和再生
再生被污染 HPLC 柱子的關鍵是知道污染物的性質并且能找到適當的溶劑來去除。如果污染是因為重復進樣時強保留物質的累積引起的,利用簡單的步驟來除去這些污染物往往能恢復其色譜行為。有時候,經過多次操作以后的色譜柱用 90~100%的溶劑 B(雙溶劑反相系統中較強的溶劑)沖洗 20 個體積可以清除污
苯基鍵合硅膠色譜柱柱為什么不能用純水沖洗
這個問題比較難回答。因為注意的東西比較多,比如:首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道,安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向,這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是,一旦開始使用,就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。第二個是
苯基鍵合硅膠色譜柱柱為什么不能用純水沖洗
這個問題比較難回答。因為注意的東西比較多,比如:首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道,安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向,這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是,一旦開始使用,就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。第二個是
苯基鍵合硅膠色譜柱柱為什么不能用純水沖洗
這個問題比較難回答。因為注意的東西比較多,比如:首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道,安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向,這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是,一旦開始使用,就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。第二個是
苯基鍵合硅膠與苯基硅烷鍵合硅膠柱一樣嗎
甲基苯基乙烯基硅橡膠甲基苯基乙烯基硅橡膠是在甲基乙烯基硅橡膠的分子鏈中引入甲基苯基硅氧鏈節或二苯基硅氧鏈節而得的產品。在聚硅氧烷的側基上引入苯基,由于破壞了二甲基硅氧烷結構的規整性,大大降低了聚合物的結晶溫度,擴大了該聚合物材料的低溫應用范圍。因此,甲基苯基乙烯基硅橡膠除了具有甲基乙烯基硅橡膠所有的
清洗鍵合硅膠反相色譜柱的方法,你知道嗎?
清洗鍵合硅膠反相色譜柱時,有時使用有機溶劑是不能去除色譜柱上的污染物的。如果金屬離子被硅膠吸附或與鍵合,這種情況就特別明顯了。這時,可以使用螯合試劑如0.05M的乙二胺四乙酸(EDTA)來沖洗色譜柱。EDTA會同許多金屬形成絡合物,并把他們進行溶解。在使用過了EDTA后,你可以用水徹底沖洗色譜柱。如
色譜柱鍵合基團有哪些
常規的鍵合基團有C8、C18、苯基、氨基、五氟苯基、氰基、裸硅膠等。
鍵合硅膠高效液相色譜柱使用中應注意哪些基本問題
首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道,安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向,這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是,一旦開始使用,就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。第二個是柱壓問題。一般的色譜柱壓力最好不要超過20MPa
鍵合硅膠高效液相色譜柱使用中應注意哪些基本問題
這個問題比較難回答。因為注意的東西比較多,比如:首先是色譜柱的方向問題。大多數色譜柱會標明方向。這個傻子都知道,安裝的時候要順著方向安裝。不過也有一些色譜柱沒有方向,這些是雙相填料的色譜柱。第一次使用時的方向就是它的方向。不過所有的色譜柱都是,一旦開始使用,就不要轉換方向。這樣會損毀色譜柱。第二個是
液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余的清洗
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物,其具有高效、快速、靈敏的特點,在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而,在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時,由于行業特性,樣品中的蛋白質殘留,時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。????在檢測
鍵合相色譜儀色譜柱的維護
鍵合相色譜儀色譜柱的維護:一、對硅膠基鍵合相,水溶液流動相的pH值不得超出2~8.5,溫度不宜過高。二、色譜柱在酸性或堿性條件下使用后,應依次用水和甲醇清洗。三、防止色譜柱被振動或撞擊,否則柱內填料床層產生裂縫和空隙,會出現駝峰或對峰。四、防止流動相逆向流動,否則會使固定相層位移,柱效下降。五、除去
如何清洗液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物,其具有、快速、靈敏的特點,在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而,在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時,由于行業特性,樣品中的蛋白質殘留,時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。在檢測生物物質如血
如何清洗液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余?
液相色譜儀檢測的對象是高沸點、難氣化的大分子化合物,其具有高效、快速、靈敏的特點,在生物醫藥研究、檢測方面有較多的應用。然而,在使用液相色譜儀檢測生物醫藥上的樣品時,由于行業特性,樣品中的蛋白質殘留,時常會對液相色譜柱造成污染。本文主要介紹液相色譜硅膠鍵合反相柱上的蛋白質殘余清洗方法。在檢測生物物質
色譜柱——硅膠基質填料
1、正相色譜正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(ZH2,APS)和氰基團(CN,CPS)的鍵合相填料。由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團的極性教強,因此,分離的次序是依據樣品中的各組份的極性大小,即極性強落的組份最先被沖洗出色譜柱。正相色譜使用的流動
液相色譜柱的色譜柱再生
液相色譜柱的色譜柱再生? ?液相柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數增加,出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰,柱效下降,需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次
液相色譜柱的色譜柱再生
?液相柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數增加,出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰,柱效下降,需要定期進行徹底清洗和再生。 1、反相柱 分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。 2、正相柱
色譜柱的再生
高效液相柱是消耗品,會隨使用時間或進樣的次數增加,出現色譜峰高降低,峰寬加大或出現肩峰,柱效下降。需要定期進行徹底清洗和再生。1、反相柱分別用甲醇:水=90:10、純甲醇、二氯甲烷等溶劑著流動相,依次沖洗,每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積。然后再以相反的次序沖洗。2、正相柱分別用正己烷、
色譜柱的再生
?反相柱的再生。采用以甲醇:水=95:5(V/V),純甲醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱的量為20一30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。?正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒每種流動相流經色譜柱的量為20
反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求
??反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求包括選擇性合適、色譜峰形良好、重現性好和應用范圍寬等。一、選擇性合適:??????? 滿足不同的分離要求。??????? 由于硅羥基的影響,許多情況下硅膠基質對整個鍵合相的性能起決定作用。內嵌極性基團鍵合相在使用高比例水溶液流動相時,色譜性能穩定。二、色譜峰形
反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求
反相鍵合相色譜儀色譜柱的選擇要求包括選擇性合適、色譜峰形良好、重現性好和應用范圍寬等。一、選擇性合適:滿足不同的分離要求。由于硅羥基的影響,許多情況下硅膠基質對整個鍵合相的性能起決定作用。內嵌極性基團鍵合相在使用高比例水溶液流動相時,色譜性能穩定。二、色譜峰形良好:滿足定量精度、靈敏度和分離度要求。
固相萃取、柱色譜和化學鍵合色譜的區別
最老的是柱色譜,也叫柱層析,當初分離葉綠素的時候,就是用碳酸鈣等粉末填在柱子里做的.后來又簡化出薄層色譜. 化學鍵合色譜,是對固定相而言,用什么碳酸鈣、硅藻土做固定相雖然經典,但適用面不夠廣.后來利用化學反應通過共價鍵將有機分子鍵合在載體(硅膠)表面,形成均一、牢固的單分子薄層而構成的固定相.
Silica硅膠色譜柱使用方法
1.稱量。200-300目硅膠,稱30-70倍于上樣量;如果極難分,也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右,所以要稱40g硅膠,用燒杯量100ml也可以。 2.攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系,就用石油醚拌。
Silica硅膠色譜柱使用方法
Silica硅膠色譜柱使用方法1.稱量。200-300目硅膠,稱30-70倍于上樣量;如果極難分,也可以用100倍量的硅膠H。干硅膠的視密度在0.4左右,所以要稱40g硅膠,用燒杯量100ml也可以。2.攪成勻漿。加入干硅膠體積一倍的溶劑用玻璃棒充分攪拌。如果洗脫劑是石油醚/乙酸乙酯/丙酮體系,就用
什么叫色譜柱再生
就是因為分析過程中在色譜柱內有殘留物,影響下次分析 要用GM0415的說法去做,是色譜柱恢復樣品分析能力的一種過程
色譜柱的如何再生
你的問題太籠統了,你是問什么固定相的色譜柱呢?不同的固定相再生方法不一樣。C18柱子清洗再生用下列10倍柱體積的溶劑清洗:(正向沖洗時流速:0.5ml/min)95%水:5%乙腈(或甲醇)(去除緩沖鹽)如系統沒有梯度功能中間增加5倍柱體積50%水:50%乙腈(或甲醇)沖洗步驟。95% 乙腈(或甲醇)
色譜柱的再生方法
(1 )反相柱的再生,采用以甲醇:水=90: 10(V/V),純甲醇,異丙醇,二氯甲烷等溶劑作流動相,順次沖洗,每種流動相流經色譜柱的量為20~30倍色譜柱體積然后再以相反順序沖洗色譜柱。(2)正相柱再生。順次以正己烷、異丙醇、二氯甲烷、甲醇作流動相沖洗色譜柱。每步注意平衡溶劑的順序,不要顛倒。每種
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明: (1)色譜柱使用前注意事項:色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容
色譜柱的再生問題
? 在色譜儀實驗中,色譜柱起著相當中的角色,色譜柱是由柱管和固定相組成,按照拄管的粗細和固定相的填充方式分為填充柱和毛細管柱。測試色譜柱的重要指標一般就是分離度、理論塔板數、峰寬、峰形等,其中分離度和理論塔板數應該更為重要。因為色譜柱是消耗品,隨著使用時間或進樣次數的增加,會出現記錄器上出現的一個個
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明:(1)色譜柱使用前注意事項:色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易
反相鍵合相色譜中,C18柱的分離原理
針對常規C18反相色譜柱無法滿足在高水相及純水流動相條件下的液相色譜分析,采用混合鍵合的方式得到一種新型親水