高效液相色譜日常簡易保養及維護——排液閥
此處不能完全密封或漏液時一般是其中的墊片污染或磨損,可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。......閱讀全文
液相色譜進樣閥使用需要留意的三點
首要咱們要留意液相色譜進樣閥溢流管的阻塞問題,當進樣閥溢流管發作阻塞咱們向閥內打針樣品時能發現打針針推不動,而造成阻塞的原因大都因為溶解樣品的活動相是鹽溶液,而其間的鹽在溢流管的排空端口處結晶所造成的。可以通過用小燒杯盛少量蒸餾水對溢流管口稍加浸泡,端口處鹽的結晶就能被溶解掉,毛病掃除。進樣閥清潔問
液質聯用中的液相色譜
據統計,已知化合物中約80%的化合物是親水性強、揮發性低的有機物,熱不穩定化合物及生物大分子,這些化合物的分析最適合于液相色譜,當然毛細管電泳也可以,只不過毛細管電泳的毛細管中無填料,因此“變數”較少,適應的復雜體系也較少,遠不及液相色譜使用得廣泛。當和質譜聯用時,液相色譜的流動相適合于流入質譜
分子排阻高效液相層析實驗
實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 SE緩沖液儀器、耗材 層析柱實驗步驟 1. ?用已脫氣HPLC級水洗去SE柱的貯存溶劑,流速1 ml/min。在室溫以已脫氣的SE緩沖液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基線穩定。2. ?注射100 μl ?緩沖液進行一次空白樣品的假層析,檢測器
分子排阻高效液相層析實驗
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SE緩沖液儀器、耗材層析柱實驗步驟1. ?用已脫氣HPLC級水洗去SE柱的貯存溶劑,流速1 ml/min。在室溫以已脫氣的SE緩沖液在1 ml/min 流速平衡SE柱30 min 或直至基線穩定。2. ?注射100 μl ?緩沖液進行一次空白樣品的假層析,檢測器設定在210
分子排阻高效液相層析實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 蛋白質 試劑、試劑盒
Waters液相色譜教程
本資料來自于Waters中國有限公司培訓中心 包括4個文件: 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識A 液相色譜教程(一)液相色譜基礎知識B 液相色譜教程(三)液相色譜實驗操作 液相色譜教程(四)液相色譜柱基礎知識 ? 下載:Waters液相色譜教程
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而
高效液相色譜特點
①高壓:流動相為液體,流經色譜柱時,受到的阻力較大,為了能迅速通過色譜柱,必須對載液加高壓。 ②高速:分析速度快、載液流速快,較經典液體色譜法速度快得多,通常分析一個樣品在15~30分鐘,有些樣品甚至在5分鐘內即可完成,一般小于1小時。 ③高效:分離效能高。可選擇固定相和流動相以達到最佳分離
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜的應用
高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩定和非揮發性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的
液相色譜維護誤區
??關于標示 1、色譜柱的流向不能改變 在我們常規思維中,色譜柱上標示的流向是不可改變的,每次使用都要遵循。可是,大家有沒有想過這個方向的作用是什么呢?為什么要標示一個使用方向呢? 其實色譜柱前后端的填料及填裝工藝都是一樣的,標示方向的目的就是讓我們在使用中記住流動相從哪個方向流入色譜柱,那么
高效液相色譜原理
以高壓下的液體為流動相,并采用顆粒極細的高效固定相的柱色譜分離技術。構造可分為高壓輸液泵,色譜柱,進樣器,檢測器以及數據獲取與處理系統等部分。與氣相色譜法相比,液相色譜法不受樣品揮發性和熱穩定性及相對分子質量的限制,只要求把樣品制成溶液即可,非常適合于分離生物大分子、離子型化合物,不穩定的天然產物以
液相色譜保養知識
1、? 色譜柱長時間不用,存放時,柱內應充滿溶劑,兩端封死(如ACN適于反相色譜柱,正相色譜柱用相應的有機相)2、? 對于手動進樣器,當使用緩沖溶液時,要用水沖洗進樣口,同時搬動進樣閥數次,每次數毫升。3、流動相使用前必須過濾,不要使用多日存放的蒸餾水(易長菌)。4、帶seal-wash的1100,
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
高效液相色譜技術
高效液相色譜(HPLC:High Performance Liquid Chromatography )是化學、生物化學與分子生物學、醫藥學、農業、環保、商檢、藥檢、法檢等學科領域與專業最為重要的分離分析技術,是分析化學家、生物化學家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。國際市場
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜的用途
高效液相色譜應用很廣泛,基本能對有機化合物中百分之七十到百分之八十的化合物進行分離與檢測,下面以安捷倫液相色譜技術做為舉例:應用液相色譜用途廣泛,已經成為大多數化學行業和生命科學行業中的標準配置。安捷倫液相色譜和液-質聯用系統正為各種客戶群服務,如藥物研制和生產、蛋白質、食品安全、環境、國土安全和石
高效液相色譜柱
一、怎樣選擇色譜柱?現代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對此有一定的認識和了解。?(1)硅膠基質填料:?1、正相色譜?正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團,如胺基團(NH2,APS)和氰基團(
液相色譜工作原理
系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相)內,由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數,在兩相中作相對運動時,經過反復多次的吸附-解吸的分配過程,各組分在移動速度上產生較大的差別,被
現代液相色譜進展
? 色譜法最初僅僅是作為一種分離手段,是根據混合物中不同組分在流動相和固定相間具有不同的分配系數,當兩相作相對運動時,這些組分在兩相間進行反復多次的分配,從而得到分離。直到五十年代,人們才開始把這種分離手段與檢測系統連接起來,成為一種獨特的分析方法,是幾十年來分析化學中最富活力的領域之一,也是生命科
液相色譜固定相
1.1 正相色譜 八十年代初,人們使用的正相色譜固定相硅膠和吡啶硫氰酸鎳鹽的絡合物晶體能與芳香族化合物形成包合物用于分離芳香族含氮異構體和膽甾醇晶體。已有人[1]將焦炭吸附劑作為填料和鍵合硅膠作過比較并研究其熱力學機理。具有離子化或非離子化功能團的大孔聚合物也開始應用于液相色譜,這些聚合物在
反相高效液相色譜
實驗材料 蛋白質標樣試劑、試劑盒 乙睛(HPLC級)去離子水(HPLC級) 三氟乙酸(TFA)儀器、耗材 HPLC 色譜系統 反相柱實驗步驟 1.進行空白或對照層析譜分析(即在步驟①中不加樣)。一般這是進行一天層析工作的開始。下面是推薦使用的用于 RP-HPLC 系統評估的標準色譜條件。(1)線性梯
液相色譜柱種類
色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類①常規分析柱(常量柱),內徑2~5mm,柱長10~30cm;②窄徑柱(narrowbore),內徑1~2mm,柱長10~20cm;③毛細管柱(又稱微柱microcolumn),內徑0.2~0.5mm;④半制備柱,內徑>5mm;⑤實驗室制備柱,內徑20~40mm,柱
液相色譜柱再生
1、色譜柱的使用說明:(1)色譜柱使用前注意事項:色譜柱的儲存液無特殊說明,均為評價報告所示的流動相。在使用前,一定要注意色譜柱的儲存液與要分析樣品的流動相是否互溶。在反相色譜中,如用高濃度的鹽或緩沖液作洗脫劑,應先用10%左右的低濃度的有機相洗脫劑過渡一下,否則緩沖液中的鹽在高濃度的有機相中很容易
如何使用液相色譜
1.電源準備打開穩壓器電源開關,須待電壓指示至220V后,才能開啟其他有關設備。2.LC-600高效液相色譜儀的準備試劑:三氟乙酸乙腈超純水(Millipore超純水)冰乙酸溶液配置:貯液瓶與流動相的準備A液0.1%三氟乙酸(三氟乙酸1ml,超純水999ml)室溫保存B液60%乙腈(乙腈600ml,
液相色譜小知識
高效液相經常使用粒徑5um?的色譜柱,用過一段時間后,柱壓會略有升高,尤其是做中藥。常用來洗色譜柱的溶劑為甲醇,當色譜柱用甲醇洗過之后,再用含乙腈的流動相平衡,會使柱壓迅速升高,色譜柱滴漏,這是由于甲醇和乙腈匯合產生局部高壓。因此,這種情況下,應慢慢升高流速,可以從0.6ml/min開始,一步步的平
何謂反相液相色譜
液-液色譜有正相和反相之分。如果采用極性固定相和相對非極性流動相,就稱為正相;如果采用相對非極性固定相和極性流動相,則稱為反相。由于極性化合物更容易被極性固定相所保留,所以正相液-液色譜系統一般可用于分離極性化合物。相反,反相液-液色譜系統一般可用于分離非極性或弱極性化合物。正相色譜的流出順序是極性