PC12細胞培養方法步驟
PC12細胞是大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株,具神經內分泌細胞的一般特征,因其具可傳代特點,廣泛應用于神經生理和神經藥理學研究。1. PC12細胞有兩種:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12細胞貼壁能力強,傳代時需要胰酶消化,形狀不規則。分化型PC12細胞傳代時不需要胰酶,直接可以吹下來,形狀規則。這兩種細胞沒有很大的區別,但我在實驗中發現,未分化型的PC12細胞對藥物的敏感性較之分化型的要差一些。2. 由于PC12細胞是一種腫瘤細胞,在傳代次數較多后,它的形狀和性狀會發生改變。這些改變尤見于未分化型PC12細胞。主要是細胞形狀變得更加不規則,對藥物的敏感性愈加下降。因此,建議長期用PC12細胞作實驗的戰友最好嚴格控制細胞的傳代次數。3.在復蘇細胞時動作一定要迅速,放入溫水中1~2min后要馬上加入培養液中,培養12~24小時后更換一次培養液,這樣不僅可以把DMSO吸掉,而且可以將死亡的細胞也吸掉。細胞一天一看即可,經常......閱讀全文
PC12細胞培養
PC12細胞是大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株,具神經內分泌細胞的一般特征,因其具可傳代特點,廣泛應用于神經生理和神經藥理學研究。1. PC12細胞有兩種:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12細胞貼壁能力強,傳代時需要胰酶消化,形狀不規則。分化型PC12細胞傳代時不需要胰酶,直接可以吹下來,形狀規
PC12細胞培養方法步驟
PC12細胞是大鼠腎上腺髓質嗜鉻瘤分化細胞株,具神經內分泌細胞的一般特征,因其具可傳代特點,廣泛應用于神經生理和神經藥理學研究。1. PC12細胞有兩種:未分化型和分化型。其中未分化型的PC12細胞貼壁能力強,傳代時需要胰酶消化,形狀不規則。分化型PC12細胞傳代時不需要胰酶,直接可以吹下來,形
PC12細胞培養所用血清問題
問:我正準備購買上海細胞所的未分化的PC12細胞,需要滅活的馬血清,可現在買血清很困難,好像是海關有封鎖,代理商這么說的,我原定購買的Gibco的horse surum,現在無法買到了,好容易找到一個目前可以進血清的公司Hyclone,有一種Donor Equine serum是馬血清嗎?答:H
PC12-Cell-Culture-and-Fusion
Cell CultureMaterials1. Falcon Primaria culture dishes.2. Culture medium: DME (or F12K) with glutamine, supplemented with 7% heat-deactivated horse se
45Ca2+-uptake-study-in-PC12-cells
45Ca2+ uptake study in PC12 cells?1. Plate the cells on to the poly-D-Lysine-coated six well plates 2 days prior to study.?2. Rinse the cells with 1 m
黃芩苷可有效抑制硫酸粘桿菌素的神經毒性
100 μg/mL黃芩苷預處理顯著減少硫酸粘桿菌素誘導的細胞核固縮和DNA片段化現象 從干燥的黃芩根中提取的黃芩苷具有抗氧化、清除氧自由基等的藥理作用,研究顯示其對β淀粉樣蛋白誘導神經元損傷也有保護作用,但硫酸粘桿菌素作為一種抗生素在臨床應用中存在神經毒性問題。東北農業大學蔣紅博士所在團隊想通
抑郁癥的體外模型
抑郁等精神疾患的發生可能與過量GC對海馬的選擇性損傷有關,但機理不明,Heuser和Cosi等報道可能是由于高濃度GC導致神經營養因子表達水平降低造成的,而抗抑郁劑不僅使GC受體上調,HPA軸反饋恢復正常,而且使神經營養因子表達升高,達到治療目的.PC12細胞株為大鼠嗜鉻細胞克隆化細胞株,分化的PC
二十碳五烯酸對大鼠海馬體突觸可塑性、不飽和脂肪酸...
二十碳五烯酸對大鼠海馬體突觸可塑性、不飽和脂肪酸綜合表現和磷酸肌醇3-激酶信號表達及對PC12細胞分化之影響安慰劑對照臨床研究表明, n-3多不飽和脂肪酸 (n-3 polyunsaturated fatty acids)能改善神經系統疾病 - 如阿爾茨海默氏病,亨廷頓氏癥和精神分裂癥等。為了評
蘇州大學最新文章探尋碳納米管與蛋白質相互作用
由于碳納米管本身具有諸多優異的物理化學性質, 已經在生物學和醫學領域展現出潛在的應用前景。 從納米科技的長期發展而言, 碳納米管的安全應用及其潛在的毒理學評價顯得非常重要。 眾所周知, 碳納米管用于載藥、診斷或成像等生物醫學領域時, 會與生物體內的各種蛋白質產生相互作用, 進而會改變碳納米管自身
五味子屬植物或可治療神經系統疾病
近日,中科院昆明植物研究所羅懷容和孫漢董研究組合作發現,五味子屬三萜類化合物的神經藥理活性,可促進腦源性神經營養因子的表達,為該化合物的生物活性研究提供了新思路。研究成果在線發表于《民族藥理學》雜志。 五味子屬植物除含有豐富的木脂素類化合物外,還含有結構多樣的三萜類化合物,如尼哥納樂酸等,
鐵中毒可致糖尿病周圍神經細胞病變
有研究表明,鐵螯合療法對糖尿病周圍神經病變有顯著療效。為探討鐵超負荷對糖尿病周圍神經病變影響的機制,中國武漢市中心醫院趙湜教授領導的團隊進行了一項研究。將PC12細胞暴露于高濃度葡萄糖作為糖尿病周圍神經病變的體外細胞模型,培養時加入枸櫞酸鐵銨來創建鐵超負荷,加入去鐵胺來降低鐵含量。高濃度葡萄糖下
細胞株的傳代與培養
培養細胞株傳代根據不同細胞采取不同的方法。貼壁生長細胞如COS-7、CHO等用消化法傳代;部分貼壁生長的細胞如PC12用直接吹打即可傳代。 一、用品 (1) ?0.25%胰蛋白酶,全培養液 (2) ?滴管,離心管,培養瓶(皿),培養瓶蓋,注射器,計數6 二、步驟 (1) 貼壁細胞的消化法
體外熒光法檢測核內體早期動力學4
Top?of pageProcedureOverviewSteps 1 - 8 Preparation of rat brain cytosolSteps 9 - 10 Culture of PC12 cellsSteps 11 - 30 Preparation of postnuclear sup
為什么有的細胞消化以后容易相互聚集
個人認為是消化程度的問題。如果胰酶處理過度,細胞就會吹不散,形成絮狀。原因是胰酶作用于細胞膜蛋白,過度處理引起細胞膜破裂,破裂細胞的DNA粘連在一起。---------最近培養PC12的時候也遇到細胞聚集的問題,我查了一些資料,有些細胞就是這樣的,容易聚集成團,消化之后一定要吹勻。消化時用低濃度的胰
針對特定細胞選擇更有效的實驗步驟
GenJet Ver.II,LipoD293及PolyJet針對哺乳動物細胞的DNA體外轉染試劑,均為您提供兩種不同的轉染步驟——一般步驟及高級步驟,這兩種步驟分別針對不同的哺乳動物細胞。高級步驟主要針對難轉的哺乳動物細胞,例如:MDCK,MDA-MB231,Caco-2等細胞。使用一般的轉染步
假人參的藥理作用
抗氧化作用 張健經對假人參葉和根中抗氧化成分的含量和活性的研究分析,并分別對維生素C、可溶性糖、POD、CAT、GSH一PX等含量進行了量化分析,得出其根部的總抗氧化能力較高。SOD活性較高,總抗氧化能力較強,具有一定的開發利用價值。[5] 神經營養 冉靚通過誘導大鼠嗜路神經瘤PC12細胞
常用細胞凋亡檢測方法(圖)3
過氧化物酶標記測定法原理:脫氧核糖核苷酸衍生物地高辛[(digoxigenin)-11-dUTP]在TdT酶的作用下,可以摻入到凋亡細胞雙鏈或單鏈DNA的3-OH末端,與dATP形成異多聚體,并可與連接了報告酶(過氧化物酶或堿性磷酸酶)的抗地高辛抗體結合。在適合底物存在下,過氧化物酶可產生很強的顏色
我國科學家在人源蛋白質三維結構研究中獲得新突破
??? (A) 人源LanCL1三維結構的主鏈飄帶示意圖. 外圍螺旋和內層螺旋分別顯示紅色和黃色. (B) 人源LanCL1的表面電勢圖. 球棍模型表示結合的谷胱甘肽. (C) 顯示經過空pBI/eGFP vector或LanCL1野生型或各種突變體轉染的PC12細胞用50 ng/
無血清培養基基本配方
1、基本適應于神經細胞,干細胞,PC12細胞?葡萄糖????????? 0.6%??谷氨酰胺???????? 2mM??NaHCO3?????????? 3mM??Hepes??????????? 5mM??胰島素???? ?2.5mg/ml??轉鐵蛋白??? 100ng/ml??孕?酮??????
無血清培養基一些基本配方
PriCells-無血清培養基一些基本配方 1、基本適應于神經細胞,干細胞,PC12細胞 葡萄糖????????? 0.6%? 谷氨酰胺???????? 2mM? NaHCO3?????????? 3mM? Hepes??????????? 5mM? 胰島素???? ?2.5mg/ml? 轉鐵蛋白?
吖啶橙的基本信息介紹
簡稱:AO AO能與無機酸形成鹽,具有綠色熒光。如果再稀釋的話,便水解成游離的AO,而呈現紫色熒光。 吖啶橙/溴化乙錠雙熒光染色測定PC12細胞凋亡(acridine orange/ethidium bromide, AO/EB): (1)細胞爬片:在6孔培養板中預先置入玻璃蓋玻片,接種細
BTG-family-proteins-and-cell-cycle-regulation
BTG2 is found to be one of the immediate early genes up-regulated by neural growth factor (NGF) and epidermal growth factor (EGF). Its transcriptional
Aβ相關乙醇脫氫酶阻斷肽可減輕神經細胞的氧化應激損傷
倒置相差顯微鏡觀察發現rAAV/ABAD-DP-6His能明顯改善過氧化氫損傷的PC12細胞的形態 在阿爾茨海默病中,Aβ與Aβ相關乙醇脫氫酶結合損傷了線粒體功能,因此阻斷Aβ與Aβ相關乙醇脫氫酶結合至關重要。來自中國吉林大學第一醫院吳江博士所帶領的團隊構建了能夠持續分泌表達Aβ相關乙醇脫
Aβ損傷模型
取出生1-2d的乳鼠,用麻醉劑處死。在D-hanks液中取大腦并分離海馬組織,胰蛋白酶消化,獲得細胞懸液,胎盤藍染色進行死活細胞記數,將細胞以5×105/ml的密度接種于預先經L-多聚賴氨酸處理的96孔和24孔培養板,其中24孔板中預先放置有蓋玻片。細胞維持在培養液中,置入5%CO2,飽和濕度的培養
細胞培養多長時間時加藥再提蛋白最好
每個細胞都不一樣,一般是細胞長到80%的時候可以鋪板你可以先做個生長曲線,確定最佳的鋪板密度和生長時間,比如PC12就加藥6小時就行,而Sao-2需要48小時,一般你可以試試培養12小時你是一次性把細胞接種到6孔板或12孔板中吧做藥物時間實驗, 一般采取"倒敘法". 假設要檢測0到72小時藥物處理的
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中科大施蘊渝院士JBC發表新成果
6月15日,國際學術期刊《Journal of Biological Chemistry》在線刊登了中國科技大學的一項研究成果,題為“Structural Basis for the Specific Recognition of RhoA by the Dual GTPase-activati
用新型自動細胞成像系統和細胞分析軟件進行基...(二)
評價化合物對心機細胞毒性的作用評價心肌細胞毒性影響,使用各種不同的心肌細胞毒性化合物處理 24 小時,然后活細胞通過 Hoechst 核染料分子標記后,MitoTracker Orange 染料標記和 AF-488 連接的鬼筆環肽染料來檢測細胞骨架的完整性。利用 ImageXpress Pi
胚胎干細胞培養技術大全
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如何尋找外泌體中可評估mTBI患者神經退行性病變和細...
如何尋找外泌體中可評估mTBI患者神經退行性病變和細胞毒性的標志物創傷性腦損傷(TBI)是全球性的公共衛生問題。由于缺乏良好的診斷工具和干預手段,TBI患者數量被嚴重低估,尤其是在體育運動員和軍人群體中。目前TBI的診斷方式只有昂貴的神經影像技術和腦脊液(CSF)檢測。輕度創傷性腦損傷(mTBI)更