為什么Westernblot出現兩個目標蛋白條帶
1.因為WB的一抗識別的蛋白質的表位是順序表位，不是空間表位，所以WB狀態下的抗原-抗體識別，與非變性的生理條件下的抗原-抗體識別不同。2.WB之前，先用分子篩純化同時也是檢測一下目的蛋白產物是否成功。也就是目的蛋白是否成功表達了，而且在提取后穩定存在了。3.非特異性的條帶分子量偏大可能是SDS PAGE出的問題，膠的濃度不合適或者樣品溶解度不夠或者電泳時間不合適等，造成了目的條帶的表觀質量變大。4.三個非特異性的分子量偏大條帶之一可能是目的蛋白在SDS PAGE出的問題出了問題，另外兩個帶可能本來就是雜帶了。可以回收后對三條帶用質譜檢測精確的分子量加以確定。5.三個非特異性的分子量偏大條帶至少應該有雜帶，雜帶出現而且與一抗相互作用，那么只能說雜帶的順序表位也能被一抗識別，必須更換專一性更高的抗體。6.還有考慮你的鎳柱親和分離的問題，是不是獲得了你的需要的目的蛋白質。......閱讀全文
sdspage蛋白條帶怎么分析
bandscan比較專業哦，可以用的。1.因為其他地方也有一定的灰度，所以條帶所在區域灰度之和會小于100%。歸一化嘛，就是把這四個值乘以一個系數，使它們之和等于100%就是了。2.這四個條帶是斜的，分析起來很麻煩，要作較正的。普通的分析軟件不知有沒有這個校正功能。即使有，作起來也麻煩。
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蛋白marker為什么能作為顯色條帶
蛋白marker可分為：一、未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;二、預染的Marker即單色預染和多色預染。在western Blot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。這個 Wes
蛋白marker為什么能作為顯色條帶
蛋白marker可分為：一、未預染的Marker即寬分子量蛋白標準、高分子量蛋白標準以及低分子量蛋白標準;二、預染的Marker即單色預染和多色預染。在western Blot過程中，分子量Marker就像個螺絲釘一樣沒雖然是個小細節，然而就是這樣一個小細節對實驗結果有著不可忽視的作用。這個 Wes
蛋白質印跡法實驗結果沒有陽性條帶或條帶很弱的原因
①目的蛋白質未充分轉移到膜上或洗膜過度，應使用麗春紅S染色以檢查轉膜效果，或減少洗膜次數，縮短洗膜時間；②抗體不匹配或一抗過期或一抗不能識別變性或還原的蛋白質，應注意選擇特異性的抗體并在有效期內使用，或改用非變性凝膠系統；③抗體濃度低，應適當增加抗體濃度，或延長孵育時間；④樣品中的目的蛋白質含量低或
蛋白質電泳條帶怎么看
蛋白質電泳條帶怎么看不能嚴格定量，只能互相比較。 無論什么染色法，條帶亮度會隨著染液多少及染色時間的不同而變化，無法嚴格定量。 page的作用更多的是看目的條帶的大小，以及兩個樣品中相同蛋白互相比較多少。不能精確算出是多少ug或ng。1.直接將帶條帶的凝膠放在 凝膠呈像系統 中進行定量分析.2.將所
蛋白質電泳條帶怎么看
蛋白質電泳條帶怎么看不能嚴格定量，只能互相比較。 無論什么染色法，條帶亮度會隨著染液多少及染色時間的不同而變化，無法嚴格定量。 page的作用更多的是看目的條帶的大小，以及兩個樣品中相同蛋白互相比較多少。不能精確算出是多少ug或ng。1.直接將帶條帶的凝膠放在 凝膠呈像系統 中進行定量分析.2.將所
為什么SDS電泳標準蛋白沒有條帶
如果使用的是蛋白Marker的話，估計還是上樣量少了，20ul。
蛋白質電泳條帶怎么看
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蛋白質電泳條帶怎么看
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不能嚴格定量，只能互相比較。 無論什么染色法，條帶亮度會隨著染液多少及染色時間的不同而變化，無法嚴格定量。 page的作用更多的是看目的條帶的大小，以及兩個樣品中相同蛋白互相比較多少。不能精確算出是多少ug或ng。1.直接將帶條帶的凝膠放在 凝膠呈像系統 中進行定量分析.2.將所需要的條帶剪切下來,
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WesternBlot蛋白條帶位置（大小）不對如何整？
膠濃度不對，不同濃度的膠跑出的蛋白條帶的位置可能有所偏差，可以調整濃度。抗體孵育不充分,建議增加抗體濃度，延長孵育時間。1）酶失活，建議直接將酶和底物進行混合，如果不顯色則說明酶失活了。選擇在有效期內、有活性的酶聯物。2）目的蛋白存在翻譯后修飾或剪切體，建議查詢相關文獻確定。3）標本中不含靶蛋白或靶
蛋白純化中有兩個條帶難以分開
難以分開的條帶一般意味著有相似的性質，比如很接近的等電點，疏水性，分子量大小。如果能夠確認不是同一條帶不完全的降解帶，那一般還能通過篩選不同的方法來分離。如果是降解帶一般需要考慮抑制降解。
蛋白質電泳條帶怎么看
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酪氨酸磷酸化相關蛋白western－blot條帶
1.首先裂解液中應該有去污劑之類的如SDS、NP-40等2.為了防止蛋白降解，還要加入蛋白酶抑制劑之類的PMSF以及胰蛋白酶抑制劑等3.為了防止磷酸化蛋白的去磷酸化，還要加入磷酸酶抑制劑之類的如氟化鈉、釩酸鈉之類等
蛋白質電泳條帶的粗細表示什么
表示這個蛋白在你所在的菌株中表達量的高低，電泳條帶的粗表達的就多，反之
western－同一蛋白為什么有兩條帶
這種情況經常遇到，許多老師的解釋就是，其中一個是經過修飾的蛋白條帶。
如何用photoshop計算蛋白條帶的灰度值
用photoshop打開蛋白條帶圖片，用吸管工具點擊某處顏色，即可查看該處的灰度值。
單向電泳小分子量蛋白無條帶原因
小分子量的蛋白質比較容易擴散，所以不容易聚集成清楚的條帶，可以試著將分離膠的電壓加大，電壓大可以使條帶聚集的比較好，但是也會出現另外一個問題，就是分辨率會降低，可能會出現多條帶擠在一起，不容易分開，應該多摸索一下，找出最適合你的蛋白的電泳條件。
19—26KD蛋白條帶用多少濃縮膠
26kd蛋白用15%的膠.因為跑50kDa以上的蛋白要用10%的。50kDa-15kDa左右的話用15%的，跑更小的蛋白（比如10左右或以下的），就要適當的把膠的濃度再提高，18%或20%都可以。所以26kd蛋白用15%的膠.如果以溴酚藍跑到膠的底部為準,26kD在10%的由下往上1/4的地方,而1
WB條帶大小和蛋白預測八字不合？
實驗室玄學千千萬，預測和結果不符占一半。WB實驗是各位小伙伴們，時常光顧的一個實驗。但就是這樣一個初級又常用的實驗，卻會出現各種稀奇古怪的問題。怎么我的條帶每次都不一樣！?比如在WB實驗鑒定蛋白時，我們得到的蛋白質條帶大小常常會和預測值有所偏差。這是身患“強迫癥”的小伙伴們不能忍的。猛男落淚，誰來看
WB目標蛋白旁又出現條帶是什么原因
可能原因很多：1 同源蛋白；2 表位相似的雜帶；3 自身蛋白的修飾，糖基化，磷酸化等；4 降解
為什么有些目的蛋白－WB－很難檢測到目標條帶？
很多時候檢測不到目的條帶的問題竟都是出在樣本制備這一步。質粒有沒有轉染到細胞中去，轉進去后有無表達，表達量是否足以用 WB 檢測，目的蛋白是否容易降解？想要得到最佳實驗結果，了解清楚這些問題比一遍一遍優化和改進 WB 操作本身更為重要。相信若非首次接觸 WB 實驗的科研同行，每人都應有一套成熟的實驗