實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題五十三
濾膜的材質分了這么幾種:再生纖維素、聚四氟乙烯、硝酸纖維和醋酸纖維等,之前只知道有有機系和水系之分?各種不同材質的濾膜適合于什么樣的樣品?答:再生纖維素膜:具有蛋白質吸收低,適用于水溶性樣品和有機溶劑;聚四氟乙烯:適用于所有有機溶劑,酸和鹽;尼龍 66:適用于絕大多數有機溶劑和水溶液,可用于強酸,70% 的乙醇,二氯甲烷,不適用與二甲基甲酰胺;醋酸纖維:不適用有機溶劑,特別適用水基溶液。......閱讀全文
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題五十三
濾膜的材質分了這么幾種:再生纖維素、聚四氟乙烯、硝酸纖維和醋酸纖維等,之前只知道有有機系和水系之分?各種不同材質的濾膜適合于什么樣的樣品?答:再生纖維素膜:具有蛋白質吸收低,適用于水溶性樣品和有機溶劑;聚四氟乙烯:適用于所有有機溶劑,酸和鹽;尼龍?66:適用于絕大多數有機溶劑和水溶液,可用于強酸,7
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十八
磺化交聯的苯乙烯 - 二乙烯基共聚物為填充劑的色譜柱在儲存過程未注意放在冰箱中,導致發霉后,柱效急劇下降,能何種方法將此色譜柱修復好?答:聚合物柱子因為不怕酸堿,就直接用強酸強堿清洗。如果是?H 型,用 1M 硫酸沖洗;如果是 Ca 型,可以先用 1M 硫酸沖洗,再用 EDTA 鈣鹽轉換回 Ca 型
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題二
如果在溶劑過濾時把水膜當成有機膜了溶解了而且這樣的溶劑又做有機相用了,造成 C18 柱壓由 1000 升到 3000,流動相是乙腈和水,問一下這樣的柱子還能用么?有沒有什么補救方法?答:溶解的膜作為了顆粒物堵塞篩板,引起柱壓上升,也只有反沖一下,如果能把堵在篩板上的膜殘渣沖走,柱壓下降了就?OK 了
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十三
做一個模擬胃內容物中藥物反應試驗,需要動態測定某藥品含量變化。分析時碰到一個棘手問題,進樣量同樣用 20ul,用對照品進樣時色譜峰形不錯,進樣品時卻一直不能得到好的峰形。后來分析是模擬胃內容物樣品的酸度過高的因素,可我通過稀釋的方法讓樣品酸度和流動相接近,雖然峰形沒問題了,卻發現因稀釋導致分析物在樣
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十二
峰形后拖尾是什么原因造成的?答:[柱物理損壞]色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。唯一的解決方法就是更換新柱。[柱內填料污染]流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要污染源。流動相所用的各種溶劑至少是分析純,盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水最好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用?0.45um 溶劑微孔
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題七
在用液相色譜同時分離多種組分時,怎么通過條件色譜條件使各個峰達到比較理想的分離效果?答:這是方法開發的大問題。方法開發建立,要做的就是:針對分析物和基體的情況不同,選擇色譜柱類型和分析條件,包括流動相溶劑類型、組成比例、pH 值、溫度和流速等參數的確定。這方面的問題,要講起來內容非常多。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十
?C18 柱,后面黑色的是我以前跑的圖,前面是我現在跑的圖形,完全一樣的東西,只是流動相不是一批配的(流動相的成分沒變),中間柱子別人用過了,峰型怎么發生了這么大的變化啊?可能的原因是什么啊?是不是柱子出了問題啊?答:從兩個圖對比很明顯可以看出是柱效嚴重下降,且伴有肩峰。不同時間配的流動相,如果成分
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十四
用乙腈作流動相時,只要那個乙腈比例稍高一點,比如 20%,即使測量波長高于乙腈截止波長比較多,也會產生比較大的溶劑峰,這怎么回事?答:如果出現溶劑峰,對你的分析結果沒任何影響,那就讓溶劑峰在那兒好了。或者你用規定的溶劑溶解提取樣品后,再用流動相稀釋一下樣品,如果稀釋后檢測限能達到的話。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十六
同樣都是 C18 柱子,液相色譜柱和 SPE ，有什么區別?答:HPLC 柱子和 SPE 小柱的對比:對比項目?????????????HPLC ????????????SPE柱管??????????????????不銹鋼管 ???????塑料管粒徑(um) ?????3,5,10 ????????
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題二十
柱子才用了四個月,是什么原因呢?是不是塌陷了呢?有什么補救的辦法嗎?答:用了四個月峰形拖尾是很正常的,需要維護清洗一下色譜柱以清除引起拖尾的柱頭污染。如果柱頭塌陷,則不好辦,從其它廢柱子里取點填料填補塌陷,可以一試,但效果不一定好。色譜柱是耗材,測定進樣針數如果達到?500 以上了,也算是物有所值,
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題三十
超高壓快速高分離度色譜柱是不是未來液相色譜柱普及應用的一個發展趨勢?答:這是個大話題,今后使用會越來越多是肯定的,但是否會替代普通壓力的液相還有爭議。超高壓也有使用上的不便,譬如容易堵,對設備硬件要求高等。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題四十
C18 柱,會用甲醇從小流量到大流量慢慢活化,這樣做的目的是什么呢?是先用溶劑活化嗎?然后再用樣品?還有測定短肽總是沖出來,該怎么解決呢?就是和溶劑峰出在一起,或者出在溶劑峰之前。?答:C18 柱,會用甲醇從小流量到大流量慢慢活化,因為色譜柱到達用戶手中時,時間長短不一,在存儲和運輸的過程中,可能存
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題八十
柱子在什么情況下可以清洗一下篩板呢?原來也討論過這個問題,我也拆下來清洗過,但我看到柱前段的污染更甚,于是就用刀片刮了刮,然后把清洗好的篩板安裝上去。問題解決了,但使用壽命會不會減少呢?答:柱頭污染了,就取出污染的,再裝一些填料。因為加入你刮了些填料,那么微觀的塔板數就少了。假入你刮得不多,僅表面,
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題四
不同的基質雜質含海量是不同的,我用 C18 分析時有可能一次就污染了,我用高流速,和反向沖洗都解決不了,是不是這根柱子就廢了,有沒有其他的辦法?答:高流速反向沖洗是對的,關鍵你用了什么溶劑沖洗呢?用原來的流動相沖洗肯定不管用,要不然就不會累積在柱子上了。你應該用流動相中的強溶劑?B 沖洗,如果不行,
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十五
RP18 和 C18 的區別?答:RP18 和普通 C18,肯定有其不同的適應性,農藥種類這么多,可能大部分農藥兩者都能用,有些就不一定。你問的 C18 適用于哪些農藥,應該從相關農藥分析方面的書籍手冊中可以查到具體什么農藥用什么色譜條件合適,其中里面肯定有選擇什么類型柱子,我這邊沒辦法一一列舉。液
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十七
在堿性條件下硅膠溶解,又生成硅羥基的機理是什么?反應方程式如何寫?答:二氧化硅溶解的反應式是:SiO2+2OH-=Si032-+H2O或者表示成水解的形式:SiO2+H2O=Si032-+2H+這說明硅膠會在堿性條件下溶解而生成硅酸根。但我們這里說的是硅膠顆粒表面的部分溶解,含有鍵合固定相的硅膠原表
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題七十
正相硅膠柱一般保存在什么溶劑里面比較合適?答:短期和長期都建議保存在正相測定所用的流動相中,一般是正己烷和極少量的異丙醇。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題六
是樣品過載問題, 按藥典檢測方法檢驗一些藥品有關物質時, 都要注入高濃度的供試液, 這樣往往使得柱過載而峰變形, 按老師的方法減小濃度和注入量均是不允許的, 怎么處理這問題?答:藥典方法中注入高濃度供試液測定有關物質,提高注入濃度是為了把雜質峰的信號增強。有時候為了把雜質峰顯現出來,主峰因過載有所變
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題一
保護柱和預柱的作用是不是一樣的,如果不一樣有什么區別么?保留時間漂移多少為可以接受的范圍?答:保護柱一般帶填料,相當于一根縮短了的色譜柱(一般是?1-2cm 長度),卡套里可更換的柱芯,柱管、篩板和填料都有。保護柱里的柱芯好像是在前面開路的掃雷部隊,流動相和樣品里如有什么損害柱子的污染物,保護柱就自
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題五
哪些原因會造成色譜峰變寬、峰高變低,有哪些解決辦法?答:確實是這樣,如果其它色譜條件沒有改變,柱效下降是導致峰變寬的主要原因。對于易電離的極性物質,如果流動相?pH 選擇不合適,分析物既有中性分子態存在,又有離子態存在,峰也會變寬變矮。色譜柱使用后柱效逐步下降是正常現象,如突然降低則屬異常。柱效下降
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題八
流動相中加入四氫呋喃對柱子有損害嗎? 我現在分析一樣品流動相中用到 20% 的四氫呋喃才能把峰分到基線. 但柱子只能用一個星期分離效果就不好了. 請問是四氫呋喃損壞了柱子嗎?答:四氫呋喃(THF)是反相色譜中洗脫能力極強的溶劑,比甲醇和乙腈都強很多。在流動相中加入 THF 能改善某些難分離的物質對的
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題九
柱子的柱效影響大嗎?一般柱子的柱效規定是多少的呀!理論塔板數一般要達到多少呢?主要有那些因素影響它。答:柱效是柱子性能好壞的一個重要體現指標。柱效會影響分離度,當然是峰形越尖銳,柱效越高,和其它峰越容易分開。另外柱效高峰形尖銳,對峰面積的積分誤差就小,甚至可以用峰高來定量。?一般?C18 柱,在測定
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題六十
普通的 C18 柱能作為正相色譜柱使用嗎?正相色譜體系中最常用也最普通的是那種色譜柱。正相柱在使用過程中與反向柱相比有什么需要注意的地方?答:普通?C18 柱作為正相柱使用,我還沒聽說過。正相色譜分離模式是指固定相的極性比流動相的極性大,反過來,流動相極性大就是反相。C18 固定相屬于疏水性相對比較
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題三
還有溶劑中的金屬過濾頭生銹了,會有什么影響?會不會影響到柱子的壽命,金屬離子和柱子有沒有什么反應??答:我覺得你就把銹當成顆粒物污染的一種,會導致拖尾、柱壓上升等。溶解的金屬離子一般在反相柱上沒有什么保留能力,馬上就會被沖出柱子,不會和固定相或者和硅膠基質反應。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題五十
常規 LC 的柱子粒度小,柱效高,現在有 3.5um 的常規柱,不知道用 3.5um*250 的壓力與 4.6um 的壓力相差多少?答:一般柱子?4.6mmx250mm 指的是其內徑和長度。粒徑才用 um 的單位,但一般標的是 5um,也有 3.5um 的。其它條件一樣,光粒徑是 3.5um 和 5
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十九
流動相里之前有酸的,做完后單純用乙腈沖洗,能把酸沖洗干凈嗎?之前他們是這樣沖的,現在懷疑柱子塌陷了,會不會是長時間在酸性環境中造成的呢?答:流動相里有酸,應該先用純水或?80:20 的水 / 乙腈溶劑沖洗吧。如果一直在酸性環境,固定相容易流失,造成保留時間前移和其它色譜性能下降。
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題十一
流動相與柱子如何才能做到匹配,達到最好的分離效果。目前我們實驗室有購買好的色譜柱,可是對樣品的分離效果不是很好。答:不同填料的色譜柱都有自己的選擇性,相同填料不同廠家以及相同廠家不同品牌之間的選擇性都是不一樣的,一般情況下根據物質的性質將分離的大方向如:正相分析或者反相分析,確定后,一般可以根據調節
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題三十三
據說液相色譜柱柱壓達到一定高度就不能使用了,請問一般達到多高,用甲醇和乙腈是不是不一樣?答:柱壓不是色譜柱不能使用的唯一因素,分離度才是最重要的。柱壓只要沒高到儀器不能承受的地步,例如超過?300bar,就可以一直使用。甲醇的粘度比乙腈高,同樣狀況的柱子,如果用甲醇做流動相,柱壓可能超了,換用乙腈會
實驗室分析儀器液相色譜儀常見問題分析色譜柱維護
①建議檢測前樣品和流動相進行過濾。②建議每天做完樣品后及時進行清洗。③常規檢測測試完后直接把色譜柱反向連接采用90%有機相沖洗45min,最后保存在純甲醇或純乙腈中。④使用緩沖鹽條件:a等度條件:使用緩沖鹽之前和之后都用過渡流動相以1ml/min流速沖洗45min。b梯度條件:使用緩沖鹽之前與初始流
實驗室分析儀器液相色譜儀色譜柱常見問題三十二
柱塞板可不可拆下用超聲波清洗,會有什么不良后果?答:不建議將柱篩板拆下清洗,因為拆下承壓的柱篩板會導致柱床發生變化,影響色譜性能。應該對污染的色譜柱先進行清洗維護,維護沒有效果,再把拆洗柱篩板作為最后的手段。