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    反向聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定 義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)......閱讀全文

    反向聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定  義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學

    隨機聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱隨機聚合酶鏈反應英文名稱random PCR定  義采用許多序列不相同的(部分隨機或全部隨機序列)、短的(約10個核苷酸)引物所進行的聚合酶鏈反應。由于在模板DNA多個不同位置上擴增,所形成的產物長度各異,電泳圖譜獨特,可用于識別核酸的多態性、研究基因組的物理圖譜及分析生物的進化等。應用學科

    實時聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱實時聚合酶鏈反應英文名稱real-time PCR定  義一種定量測定樣品中特定DNA序列的聚合酶鏈反應。即使用標記(最常用是熒光標記)的PCR引物,因而能夠通過熒光監測到每一次PCR循環后擴增所得DNA產物的量,從連續監控下獲得的反應動力學曲線,可推導得樣品中被擴增模板DNA的原初含量。應

    反向聚合酶鏈反應

    中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定  義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學

    反向聚合酶鏈反應技術

     我們描述一種大聚合酶鏈反應(PCR)應用的方法,使在已知序列的核心區邊側的未知 DNA成幾何級數擴增。用適當的限制性內切裂解含核心區的DNA,以產生適合于PCR擴 增大小的片段,然后片段的末端再連接形成環狀分子。PCR的引物同源于環上核心區 的末端序列,但其方向性,使鏈的延長經過環上的未知區而不是

    反向聚合酶鏈反應的定義

    中文名稱反向聚合酶鏈反應英文名稱inverse PCR;iPCR定  義用于擴增已知序列的DNA旁側未知序列的方法。即先用在已知DNA序列上沒有識別位點的限制內切酶,切出包含已知DNA、而兩端帶有未知序列的區段,將切出的DNA區段環化,然后再按已知的DNA序列設計一對引物進行擴增。應用學科細胞生物學

    剪接重疊延伸聚合酶鏈反應的原理和應用特點

    中文名稱剪接重疊延伸聚合酶鏈反應英文名稱splicing overlapping extension PCR;SOE-PCR定  義利用一系列聚合酶鏈反應,使產物兩端彼此重疊,以便剪接成長片段,其間越過某段序列可使之缺失的PCR方法。一些基因工程抗體就是用此法制備的。應用學科生物化學與分子生物學(一

    聚合酶鏈反應剪接的原理和應用

    中文名稱聚合酶鏈反應剪接英文名稱PCR splicing定  義利用聚合酶鏈反應進行基因剪接以刪除DNA中一段特定序列的方法。系設計兩組引物,先分別擴增擬刪除序列上下游兩側的序列,再用上游序列5′端引物和下游序列3′端引物用PCR反應進行連接。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二

    定量聚合酶鏈反應的應用特點

    中文名稱定量聚合酶鏈反應英文名稱quantitative PCR;qPCR定  義將某種已知含量的DNA模板作為內標準進行PCR反應,對待測模板進行定量分析的方法。更靈敏的定量PCR是采用實時PCR方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)

    反轉錄聚合酶鏈反應的功能和特點

    RT—PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)是將RNA的反轉錄(RT)和cDNA的聚合酶鏈式擴增(PCR)相結合的技術。首先經反轉錄酶的作用,從RNA合成cDNA,再以cDNA為模板,在DNA聚合酶作用下擴增合成目的片段。RT—PCR

    聚合酶鏈反應的反應特點

    特異性強PCR反應的特異性決定因素為:①引物與模板DNA特異正確的結合;②堿基配對原則;③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應中模

    聚合酶鏈反應原理介紹

      PCR是體外酶促合成特異DNA片段的新方法,主要由高溫變性、 低溫退火和適溫延伸三個步驟反復的熱循環構成:即在高溫(95℃)下,待擴增的靶DNA雙鏈受熱變性成為兩條單鏈DNA模板;而后在低溫(37~55℃)情況下,兩條人工合成的寡核苷酸引物與互補的單鏈DNA模板結合,形成部分雙鏈;在Taq酶的最

    聚合酶鏈反應克隆的原理

    中文名稱聚合酶鏈反應克隆英文名稱PCR cloning定  義應用聚合酶鏈反應的技術獲得DNA分子克隆的方法。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用1

    第一節 概述  聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應(Polymerase Chain Reaction, PCR),又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique),是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式,不通過活細胞,操作

    聚合酶鏈反應(PCR)技術的發展和應用2

    第五節 PCR各處應用模式  一、兼并引物(Degenerate Primer)PCR  密碼子具有兼并性,如表22-4,單以氨基酸順序推測編碼的DNA序列是不精確的,但可以設計成對兼并引物,擴增所有編碼已知順序的核酸序列。用兼并引物時寡核苷酸中核苷酸序列可以改變,但核苷酸的數量應相同。兼并度越低,

    聚合酶鏈反應的常規應用介紹

    用于治療感染性疾病,腫瘤及遺傳病。感染性疾病PCR在醫學檢驗學中最有價值的應用領域就是對感染性疾病的診斷。理論上,只要樣本有一個病原體存在,PCR就可以檢測到。一般實驗室也能檢出10~100基因拷貝,而目前病原體抗原檢測方法一般需要105-7個病原體才可檢測到。PCR對病原體的檢測解決了免疫學檢測的

    聚合酶鏈反應[PCR]實驗原理和操作步驟(1)

    【實驗原理】聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction)即PCR技術是美國Cetus公司人類遺傳研究所的科學家K.B.Mullis于1983年發明的一種體外擴增特定基因或DNA序列的方法。PCR具有很高的特異性、靈敏度,在分子生物學、基因工程研究、某些疾病的診斷以及臨床標

    聚合酶鏈反應[PCR]實驗原理和操作步驟(2)

    【實驗目的】了解聚合酶鏈反應(PCR)的基本原理及其影響因素,掌握PCR的基本操作過程。[儀器]PCR儀、臺式離心機、電泳儀、電泳槽、紫外檢測儀[試劑]1、引物:用去離子水配成10 μmol /μL。2、Taq聚合酶3、10×PCR反應緩沖液(加鎂離子)4、dNTPs:四種核苷酸混合物,濃度為10m

    聚合酶鏈反應的用途和特性

    PCR反應擴增出了高的拷貝數,下一步檢測就成了關鍵。熒光素(溴化乙錠,EB)染色凝膠電泳是最常用的檢測手段。電泳法檢測特異性是不太高的,因此引物兩聚體等非特異性的雜交體很容易引起誤判。但因為其簡捷易行,成為了主流檢測方法。近年來以熒光探針為代表的檢測方法,有逐漸取代電泳法的趨勢。

    逆轉錄聚合酶鏈反應的原理

    組織或細胞中的總RNA,以其中的mRNA作為模板,采用Oligo(dT)或隨機引物利用逆轉錄酶反轉錄成cDNA.再以cDNA為模板進行PCR擴增,而獲得目的基因或檢測基因表達.RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能.該技術主要用于:分析基因的轉錄產物,

    連接酶鏈反應的特點和應用

    連接酶鏈反應(Ligase chain reaction,LCR),是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上,引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增,又可鑒定D N A 異常,與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。

    連接酶鏈反應的特點和應用

    連接酶鏈反應(Ligase chain reaction,LCR),是在連接酶擴增反應或連接酶檢測反應的基礎上,引入熱穩定的連接酶而建立的類似PCR 技術的新方法。LCR 既可擴增,又可鑒定D N A 異常,與PCR 技術一樣可用于已知病因的遺傳病大面積普查。

    逆轉錄聚合酶鏈反應的技術應用

    RT-PCR使RNA檢測的靈敏性提高了幾個數量級,使一些極為微量RNA樣品分析成為可能。該技術主要用于:分析基因的轉錄產物、獲取目的基因、合成cDNA探針、構建RNA高效轉錄系統。

    原位聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱原位聚合酶鏈反應英文名稱in situ PCR定  義在DNA模板分子原來所在的位置處(如細胞、組織中)進行聚合酶鏈反應的技術。能夠直接指示出DNA模板的部位。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)

    Alu聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱Alu聚合酶鏈反應英文名稱Alu-PCR定  義從復雜來源樣品中特異擴增人基因組DNA的方法。Alu是人基因組中特有的高度重復序列,散布于整個人的基因組中。設計能識別Alu保守區序列的聚合酶鏈反應引物,就能特異地擴增獲得人基因組DNA。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二

    阻抑聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱阻抑聚合酶鏈反應英文名稱suppression PCR定  義抑制非特異擴增、而選擇性擴增那些只知道部分序列目的DNA的一種聚合酶鏈反應方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接頭,設計引物一個與人工接頭互補,另一個與目的DNA互補,非特異PCR產物由于兩端有顛倒重復序列,退火時會自身形成環

    阻抑聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱阻抑聚合酶鏈反應英文名稱suppression PCR定  義抑制非特異擴增、而選擇性擴增那些只知道部分序列目的DNA的一種聚合酶鏈反應方法。即先在所有的DNA 5′端加上人工接頭,設計引物一個與人工接頭互補,另一個與目的DNA互補,非特異PCR產物由于兩端有顛倒重復序列,退火時會自身形成環

    競爭聚合酶鏈反應的方法及應用介紹

    中文名稱競爭聚合酶鏈反應英文名稱competitive PCR;cPCR定  義在反應體系中加入已知含量的內參照競爭模板,該模板與待測模板可以等效擴增,擴增過程中或擴增結束后,可用某些手段區分和定量待測物和競爭物的擴增產物,比較兩者的量即可知待測模板含量的一種定量聚合酶鏈反應技術。應用學科生物化學與

    聚合酶鏈反應技術的臨床應用及現狀

    PCR是英文Polymerase chain reaction的縮寫,翻譯過來,稱為聚合酶鏈反應。PCR自1983年由美國加利福尼亞的Cetus公司的Mullis博士發明到現在,雖只短短的二十多年,但其在生命科學研究和臨床分子診斷中,已毫無爭議的成為“支點”工具。如果沒有PCR,人類基因組計

    定量聚合酶鏈反應

    中文名稱定量聚合酶鏈反應英文名稱quantitative PCR;qPCR定  義將某種已知含量的DNA模板作為內標準進行PCR反應,對待測模板進行定量分析的方法。更靈敏的定量PCR是采用實時PCR方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)

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