染色體制片步驟
1、取對數生長期細胞一個T75或T25瓶。2、將培養基換成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培養基,處理1~2小時。3、將細胞培養液倒掉,馬上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后,馬上加入終止液終止消化,并將分裂相細胞收集在一個15ml的離心管中,并在1200r/min離心4min。4、將上清液倒掉,剩余50ul左右的液在管中,并輕微震動,使細胞沉淀重新懸浮。5、加入10ml的低滲液(0.075M KCL),第一毫升要逐滴加入,并邊加邊搖晃。6、37℃水浴中低滲30min。7、再加入1ml冰冷的固定液(甲醇:乙酸=3:1 的混合液),并馬上搖勻,離心,1000r/min、10min。8、同步驟4。9、加入10ml冰冷的固定液,第一毫升要逐滴加入,邊加邊搖晃。10、室溫下固定30min,然后離心,1000r/min、10min。11、同步驟4......閱讀全文
染色體制片
實驗概要掌握染色體制片的基本程序。實驗步驟1. 取對數生長期細胞一個。2. 將培養基換成10mL DMEM(H) 10%FBS 0.1μg/mL秋水仙素的培養基,處理1~2小時。3. 將細胞培養液倒掉,馬上加入3~4mL 0.1%胰蛋白酶,并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后
植物染色體制片
實驗概要掌握染色體制片方法,并自選材料進行染色體制片;學會染色體核型分析。主要試劑酒精、冰醋酸、甲醇、鹽酸、鐵礬、蘇木精(或洋紅、石炭酸品紅)、秋水仙堿(或對二氯苯飽和水溶液、8-羥基奎啉、富民隆乳劑)、二甲苯、中性樹膠、石碳酸、甲醛、山梨醇等。主要設備顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、吸水紙、紗布塊、
染色體制片步驟
1、取對數生長期細胞一個T75或T25瓶。2、將培養基換成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培養基,處理1~2小時。3、將細胞培養液倒掉,馬上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后,馬上加入終止液終止消化,并將分
果蠅唾腺染色體制片實驗
實驗方法原理 果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態,由于多次復制而不分開,因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.,本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,,壓制染色體玻片標本的方法,觀察多線染色體的特征。實驗材料 果蠅試劑、試劑盒 水醋酸洋紅儀器、耗材 解剖
果蠅唾腺染色體制片技術
實驗概要1、練習分離果蠅幼蟲唾腺的技術,學習唾腺染色體的制片方法;?2、觀察果蠅唾腺的形態學及遺傳學特征;?3、了解體細胞染色體配對現象;實驗原理本世紀初,D.Kostoff用壓片法首先在D.melanogaster果蠅幼蟲的唾液腺細胞核中發現了特別巨大的染色體—唾液腺染色體(salivary
果蠅唾腺染色體制片實驗_觀察法
實驗方法原理果蠅唾腺染色體是處于體細胞同源染色體的配對狀態,由于多次復制而不分開,因而形成具有1 000-4 000根染色體絲的巨大染色體,又稱為多線染色體.,本實驗利用剖離果蠅三齡幼蟲的唾腺,,壓制染色體玻片標本的方法,觀察多線染色體的特征。實驗材料果蠅試劑、試劑盒水醋酸洋紅儀器、耗材解剖針雙筒解
小白鼠骨髓細胞染色體制片技術
實驗概要1、掌握哺乳動物骨髓細胞染色體玻片標本的制備方法。?2、觀察動物染色體的形態特征,統計小白鼠體細胞中染色體數目。實驗原理制備染色體標本是細胞遺傳學最基本的技術,優良的染色體制片是進行染色體顯帶、組型分析、原位雜交等的先決條件。?制備動物染色體標本原則上可以從所有發生有絲分裂的組織和細胞懸液中
人體外周血淋巴細胞培養及染色體制片
實驗概要學習和掌握人體微量血液體外培養制備染色體標本的方法。實驗原理人體的1ml 外周血中一般含有約1-3×106個小淋巴細胞,通常它們都處于間期的GO和G1期。在培養條件下給予藥物刺激時,經過53-72小時可在培養物中獲得大量的有絲分裂細胞,供染色體標本制備和分析之用。這種外周血培養方法是在1
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺激
人外周血淋巴細胞的培養及染色體制片實驗
實驗方法原理 外周血是制備動物染色體標本的重要材料之一,但通常情況下哺乳動物的外周血中是沒有分裂相的,其他動物如兩棲類外周血中也只是偶爾能見到分裂相。外周血中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期,在人工離體培養的培養基中加入植物凝集素(photohemagglutinin,PHA)后,小淋巴細胞受刺
植物花粉母細胞減數分裂染色體制片與觀察
一、實驗目的了解高等植物小孢子母細胞減數分裂的過程,觀察減數分裂中染色體 ?的動態變化;學習并掌握植物細胞減數分裂染色體標本的制作方法。二、實驗材料玉米(Zea mays )2n=20、水稻(Oryza sativa )2n=24、蠶豆(Vicia faba )2n=12等作物的花藥,任選一種。
植物花粉母細胞減數分裂染色體制片與觀察實驗
一、實驗目的 了解高等植物小孢子母細胞減數分裂的過程,觀察減數分裂中染色體的動態變化;學習并掌握植物細胞減數分裂染色體標本的制作方法。 二、實驗材料 玉米 (Zea mays )2n=20、水稻( Oryza sativa
動物骨髓細胞有絲分裂染色體制片材料、原理和步驟2
2.第3步可省去,改用1ml 注射器直接鉆入骨末端即可,避免剪去骨骺時損失過多骨髓細胞; 3.在分離股骨大轉子一端時,應防止折斷股骨頭; 4.如有需要,細胞懸液可用尼龍網過濾,進一步去除骨碎片及雜質。 四、實驗結果及思考題 1.在低倍及中倍鏡下觀察Giemsa染色之后的染色體制片,尋
動物骨髓細胞有絲分裂染色體制片材料、原理和步驟1
實驗九 動物骨髓細胞有絲分裂染色體制片 一、實驗目的: 了解動物細胞染色體制片的原理,學習骨髓細胞染色體的制片方法,觀察動物細胞染色體的數目和形態。 二、實驗原理: 染色體是基因的載體。真核細胞染色體的數目和結構是重要的遺傳指標之一。制備染色體標本是細胞遺傳學最基本的技術,優良的染色
顯微制片技術
?顯微制片技術?????在進行顯微鑒別時,首先要將“檢樣”制成適于鏡檢的標本。對于完整的藥材可制成各種切面的切片;對于粉末藥材(包括丸、散等成方)可直接裝片或作適當處理后制片。2??永久片制作技術2??臨時制片技術2??滑走切片機——半自動切片機2??透射光生物學顯微鏡2??連續變倍體視顯微鏡2??
顯微制片試液
試液——封藏劑3.l??水合氯醛試液??為常用封藏液,也是透化劑。可使干縮的細胞膨脹而透明,并能溶解淀粉粒、樹脂、蛋白質、葉綠素及揮發油等,加熱后更為明顯。3.2??甘油醋酸試液(斯氏液)??為常用封藏液,專用于觀察淀粉形態,可使淀粉粒保持原形,便于測量其大小。3.3??甘油-乙醇溶液??封藏液,也
整裝制片的概念
中文名稱整裝制片英文名稱whole mount preparation定 義將生物樣品整封的方法。用于單細胞、微小生物體或分散的器官。直接用于顯微觀察。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
病理制片技術取材
一、概念取材是將送檢標本進行客觀描述并將病變部位組織切成厚薄適度的小片后裝入小盒(進入組織脫水程序),取材至關重要。二、取材環境取材室由取材臺、記錄桌、標本陳列架、電腦查詢等組成;取材臺應有良好的排風、進出水系統,配備齊全的刀、剪、鑷、尺等基本工具和備用固定劑,記錄桌應備 有打號機(無時應用鉛筆
植物制片實驗技術
實驗概要植物制片技術是植物顯微技術的一個重要組成部分,在有關植物形態建成、植物雜交育種、作物病蟲害防治、藥用植物的培育和鑒別以及林木材性鑒定等多方面的研究工作中,都需要應用顯微制片技術,本實驗介紹了植物制片基本方法。主要試劑1. FAA固定液(福爾馬林-冰醋酸-酒精),又稱萬能固定液或稱標準保全液。
植物制片實驗技術
實驗概要 植物制片技術是植物顯微技術的一個重要組成部分,在有關植物形態建成、植物雜交育種、作物病蟲害防治、藥用植物的培育和鑒別以及林木材性鑒定等多方面的研究工作中,都需要應用顯微制片技術,本實驗介紹了植物制片基本方法。 主要試劑 1. FAA固定液(福爾馬林-冰醋酸
病理制片技術——封片
封片是將組織切片封固保存于載玻片與蓋玻片之間,使之不與空氣發生接觸,防止其氧化、褪色,利于鏡檢觀察及保存。一、手工封片手工封片應注意以下七點。(1)所用樹膠濃度要適中,以一般速度滴下并恰能成珠既可。太稀時易溢出玻片,當二甲苯揮發后,組織切片就會收縮產生膠不勻并出現大片氣泡。太濃時,滴在玻片上樹膠不易
病理制片技術——包埋
一、意義組織塊經過固定、脫水、透明、浸蠟等處理后,用包埋劑(如石蠟、樹脂、塑料等)將其包制成含組織塊的蠟塊或塑料塊等的過程稱為包埋。不同的包埋方法有不同的要求,經包埋后,組織可達到一定的硬度和韌度,有利于切成理想的薄片。二、包埋步驟先將熔化的石蠟注入包埋托內(模具),而后用鑷子將經過浸蠟的組織塊從脫
什么是細胞整裝制片?
?中文名稱整裝制片英文名稱whole mount preparation定 義將生物樣品整封的方法。用于單細胞、微小生物體或分散的器官。直接用于顯微觀察。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
園藝植物制片方法
一、徒手制片 1. 徒手制片及特點 徒手制片(切片)一般指徒手用刀片(常用單面刀片)把新鮮的植物材料切成薄片的制片方法。此法在植物制片中具有十分重要的地位,是一種普遍應用的制片方法。 徒手制片的主要優點是:能及時觀察研究植物生活組織的結構和天然色彩;方法及用具簡單,不需切片機等機械設備,短時間即可
細胞染色制片方法
1、?? 取對數生長期細胞一個T75或T25瓶。2、?? 將培養基換成10ml DMEM(H)+10%FBS+0.1ug/ml秋水仙素的培養基,處理1~2小時。3、?? 將細胞培養液倒掉,馬上加入3~4ml 0.1%胰蛋白酶,并立即搖晃0.5~1min。當在顯微鏡下看到分裂相細胞脫壁后,馬上加入終止
顯微制片染色劑
染色劑3.4??蘇丹Ⅲ試液???此液可使木栓化、角質化細胞壁及脂肪油、揮發油、樹脂等染成紅色或淡紅色。3.5??釕紅試液(臨用新制)此液可使粘液染成紅色。3.6??間苯三酚試液??此液與濃鹽酸合用,可使木化細胞壁染成紅色或紫紅色。3.7??碘試液(臨用現配。應置棕色瓶內保存)此液可使淀粉染成藍色或紫
病理制片技術——組織脫水
組織經固定后會有大量水分,組織脫水是用某些溶劑逐漸將組織內的水分置換出來,以利于透明劑和石蠟的滲入。 一、手工脫水 1.器械準備:大標本缸6個,浸蠟用金屬缸3個,脫水籃,恒溫烤箱。 2.日常工作程序見表5.1。 表5.1 手工脫水日常工作程序
病理制片技術——常規染色
蘇木精(hematoxylin)和伊(eosin)染色方法,簡稱HE染色方法,是生物學、細胞學與組織學最廣泛應用的染色方法。在病理科稱為常規染色 方法。病理學的診斷都是以HE方法為基礎的。染色的目的是把組織切片或細胞涂片等浸入染料及其他染色劑配成的染色液中,經過適當的時間和處理,
顯微標本的制作粉末制片
粉末制片???主要用于粉末狀的藥材及藥材粉末制成的成方制劑的觀察。4.2.l??藥材粉末制備??取干燥藥材,磨或銼成細粉(通常應過80目以上藥篩),裝瓶,貼上標簽。制備粉末時,注意取樣的代表性。例如:根類藥材要切取根頭、根中段及根尾等部位,并全部磨粉,過4號篩,混合均勻,不得丟棄渣頭。干燥時,一般溫
顯微鏡常用制片法
常用制片法???藥材切片標本的制作方法較多。在藥材鑒定的研究工作中往往將其制成石蠟切片(永久切片),因制成的石蠟切片外形較完整,厚薄均勻,且可制得連續切片,觀察時方便,又能長期保存。但由于制片技術較復雜,費時太多,不適用于日常檢驗。徒手切片或滑走切片法:表面裝片:為觀察葉類、花類及全草類藥材的葉片、