多光子顯微鏡中的焦點深度擴展方法（二）
為了解決使用單個環擴展焦深光通量不夠的問題， BINGYING CHEN等人利用超短脈沖相干長度短的特性，采用多環結構的分束掩模，超快激光脈沖經過時會被分束掩模分成不同的環形子束，每個子束都有時間延遲，也就是每個子束在不同的時間點在物鏡的焦平面上形成貝塞爾焦點。如果每個環引入的時間延遲大大超過了激光脈沖的持續時間，則子束將互不相干，產生的EDF焦點是所有單個貝塞爾焦點的非相干疊加，如圖5所示。圖5 a：分束掩模結構圖；b：分束掩模擴展焦點深度的原理示意圖；c：模擬的不同環形光非相干疊加的結果（1－5表示由內到外，EDF：深度擴展后的焦點）基于實驗設計的掩模參數，該組進行了數值模擬，結果如圖6，最大NA為0．67時計算得到的橫向和軸向分辨率分別為550nm和15．98μm，比常規聚焦方式的軸向尺寸大4．96倍，而橫向半高全寬僅比常規聚焦方式大7％。圖6 點擴散函數的數值模擬結果該組搭建的實驗裝置如圖7所示，由鈦寶石激光器輸出的中心......閱讀全文
多光子顯微鏡中的焦點深度擴展方法（二）
為了解決使用單個環擴展焦深光通量不夠的問題， BINGYING CHEN等人利用超短脈沖相干長度短的特性，采用多環結構的分束掩模，超快激光脈沖經過時會被分束掩模分成不同的環形子束，每個子束都有時間延遲，也就是每個子束在不同的時間點在物鏡的焦平面上形成貝塞爾焦點。如果每個環引入的時間延遲大大超過了激光
多光子顯微鏡中的焦點深度擴展方法（一）
雙光子激光掃描顯微鏡結合鈣指示劑是活體神經元信號探測的金標準。神經網絡中的神經元分布在三維空間中，監測它們的活動動態需要一種能夠快速提高體積成像速率的方式。但是，使用光柵掃描多光子顯微鏡對大量圖像進行成像，如果采用高數值孔徑（NA）的物鏡來獲得較高的橫向分辨率時，會導致較小的聚焦深度，為了獲得小聚焦
關于多焦點多光子顯微技術的簡介
多焦點多光子顯微技術是 20 世紀末發展起來的, 它與單光束激光掃描顯微鏡 相比最大的變化是： （1） 需要一 個光束分離裝置（如右圖）產生多個焦點； （2） 需要一個探測器能夠探測從所有焦點處發出的熒光信號 。 多焦點多光子顯微技術采用旋轉微透鏡盤 、微透鏡陣列 [6]、級聯分束鏡 [7
多焦點多光子顯微技術進展的概述
生物醫學發展對檢測和成像系統的一個要求是在一次測量中能以很高的靈敏度和特異性得到多種功能信息, 另一個要求是能夠無損、實時監測活體細胞的動態過程 , 這也成 為了熒光顯 微技術不斷發展和進步的源動力 。多焦點多光子顯微技術在提高激發光能 利用率的同時 , 也提高了成像速度, 從而使實時雙光子激發
關于多焦點多光子顯微技術的簡介
多交點多光子顯微技術（multifocal multiphoton microscopy，MMM）提高了激發光能的利用率和成像速度，可以實現樣品的三維快速多光子激發熒光顯微成像，并且具有對活體樣品損傷小，成像深度大，圖像信噪比高等優點。 熒光顯微技術已經成為生物醫學領域的重要研究工具，激光掃描
關于正置多焦點多光子顯微鏡的簡介
正置多焦點多光子顯微鏡是一種用于生物學領域的分析儀器，于2016年05月27日啟用。 正置多焦點多光子顯微鏡的技術指標： 多種激光器靈活選擇：405 nm、445 nm、488 nm、515 nm、561 nm、638 nm，輸出功率可調；檢測模塊“標準”：ICX 285 感光元件（CCD）
LaVision雙光子顯微鏡多焦點掃描與光激活蛋白在...（二）
3. 結果Fig. 2.含有核輸入輸出信號的擬南芥轉錄因子LCL1 (分別為NLS, NES). 由質粒編碼GFP融合蛋白轉染的煙草BY-2原生質體。通過單光子共聚焦激光掃描顯微鏡分析的GFP融合蛋白穩定態定位。(a) GFP-LCL1 揭示的核與細胞質間的分區?(b) 使用核輸出抑制劑leptom
擴展焦點功能
計測：可以計數，計測2點間的距離、面積等。每次計測都能自動進行統計處理。???? 擴展焦點功能：合成若干幅焦點位置不同的影像，構建全部都對焦正確的影像。也能清楚的觀察有高矮差別的樣本。???? 3D合成圖像：通過粘貼由擴展焦點功能得到的全對焦圖像，來創建實時3D圖像。能任意地擴大、縮小、移動、旋轉圖
可見光雙光子激發及多焦點激光掃描的結合（二）
在此基礎上,實驗對海拉細胞中的高爾基體(mTFP1)和纖顫蛋白(EGFP)進行了在體成像,見圖3(j)-(n),青色為mTFP1,綠色為EGFP,實驗中兩種熒光蛋白同時成像,最終采用光譜分離法將不同蛋白的熒光信號分離出來。圖4 海拉細胞在體延時三維觀察高爾基體的成像結果后續還進行了海拉細胞的活體高爾
簡述正置多焦點多光子顯微鏡的主要功能
正置多焦點多光子顯微鏡，無蓋玻片樣品制備和多視角成像為自由角度觀察樣品造就絕佳機會。角度成像數據的融合能夠提高空間分辨率并使圖像信息內容更加豐富。在一個時間序列內且完全相同的實驗條件下，采集實驗組和對比組的多角度數據集。或者在一個實驗中觀察多個樣品并獲得高通量數據。可以從最完美的視角或同時從多個
LaVision雙光子顯微鏡多線掃描雙光子成像（二）
2. 方法與結果??? 為了從激光掃描顯微鏡的功能性成像中得出重要結論，一個高的時間分辨率是很重要的。在低光情況下，這通常通過進行單線掃描來獲取。這被以一個垂直系統（VS）神經元的突觸前分支的激光共聚焦(Leica SP2)鈣離子成像示例 (see Fig. 1, Table 1). 這類神
LaVision雙光子顯微鏡多焦點掃描與光激活蛋白在...（一）
LaVision雙光子顯微鏡-多焦點掃描與光激活蛋白在核轉運研究中的應用Multifocal two-photon laser scanning microscopy combined with photo-activatable GFP for in vivo monitoring of intr
LaVision雙光子顯微鏡多焦點掃描與光激活蛋白在...（三）
Fig. 5. 煙草BY-2原生質體中At2g38360-DsRed的定位和平行雙光子熒光顯微鏡對pa-GFP的3D監測（64 foci, 920 nm, 240 mW)。 (a) 雙光子熒光下降的量化分析，給出了一個123s的擴散時間常數。Figs. 3 and 4中的數據源于兩個不同
多光子顯微鏡成像技術：多光子顯微鏡用于體內神經元...
多光子顯微鏡成像技術：多光子顯微鏡用于體內神經元成像的多種技術與傳統的單光子寬視野熒光顯微鏡相比,多光子顯微鏡(MPM)具有光學切片和深層成像等功能,這兩個優勢極大地促進了研究者們對于完整活體大腦深處神經的了解與認識。2019年,Jerome Lecoq等人從大腦深處的神經元成像、大量神經元成像、高
多光子顯微鏡成像技術：雙光子顯微鏡角膜成像
角膜提供了眼睛的大部分折射能力,由5層組成(圖1),從外到內依次是上皮層,鮑曼層、基質、角膜后彈力層(間質膜)、內皮層。圖1 角膜的組織學結構上皮層負責阻擋異物落入角膜,厚約50μm,由三種細胞構成,從外到內依次是表層細胞、翼細胞和基底細胞。只有基底細胞可進行有絲分裂和分化,基底細胞的補充是由從角膜
多光子顯微鏡成像技術：雙光子顯微鏡角膜成像
角膜提供了眼睛的大部分折射能力,由5層組成(圖1),從外到內依次是上皮層,鮑曼層、基質、角膜后彈力層(間質膜)、內皮層。 wx_article_20200815180121_819doe.jpg 圖1 角膜的組織學結構 上皮層負責阻擋異物落入角膜,厚約50μm,由三
可見光雙光子激發及多焦點激光掃描的結合（一）
對活體生物樣品的三維觀測是了解細胞功能的重要方法之一。目前已有的三維熒光成像技術包括光片顯微成像技術、晶格光照明技術以及激光掃描顯微成像技術(如共聚焦顯微鏡及雙光子顯微鏡)等。其中激光掃描顯微鏡利用旋轉盤可以進行多焦點的激光掃描,提高時間分辨率,而且有利于減少活細胞成像中的光損傷。本篇文獻主要實現了
LaVision雙光子顯微鏡多線掃描雙光子成像（一）
Journal of Neuroscience Methods 151 (2006) 276–286Application of multiline two-photon microscopy to functional in vivo imagingRafael Kurtz a,?, Matthi
LaVision雙光子顯微鏡多線掃描雙光子成像（三）
2.2.多線TPLSM中通過成像檢測釋放光??? 在單光束TPLSM中，光電倍增管PMT或者雪崩二極管APD可以很方便地用于釋放光檢測，由于雙光子激發的原理，激發只發生在激光焦點處。因此，用于屏蔽離焦光線的共焦小孔變得不必要，并且可以使用NDD檢測。這意味著激發光不會被送回掃描鏡，而是直接進入位于靠
LaVision雙光子顯微鏡多線掃描雙光子成像（四）
2.3. 多線TPLSM中的獲取模式??? 我們以兩種獲取模式操作多線TPLSM：第一種，整個研究使用所謂“幀掃描”模式，以64束激光在X、Y方向掃描樣品。因此焦平面上激發了均一性照明，假定光束陣列的橫向步長尺寸沒有過于粗糙（通常使用≤400 nm的步長尺寸）。在Fig. 3A，展示了以“幀
北京腦所吳江來實驗室打造至簡微型雙光子顯微鏡，賦能自由活動小鼠高清高通量神經成像
RESEARCH PROGRESS 2025年11月29日，北京腦科學與類腦研究所吳江來實驗室在Nature Communications上發表題為High-throughput two-photon volumetric brain imaging in freely moving mice
顯微鏡中的偏光顯微鏡
隨著光學技術的不斷進步，偏光顯微鏡的應用范圍也越來越廣闊，許多行業，如化工，半導體工業以及藥品檢驗等等，都廣泛地使用偏光顯微鏡。偏光顯微鏡產品優勢：錐光觀察更加清楚。1、優勢的散熱裝置，LED照明可選。2、無限遠光學系統，成像更加清晰。3、真正無應力物鏡，中心可調，保證實驗數據的精準性。4、微調格值
顯微鏡中的偏光顯微鏡
隨著光學技術的不斷進步，偏光顯微鏡的應用范圍也越來越廣闊，許多行業，如化工，半導體工業以及藥品檢驗等等，都廣泛地使用偏光顯微鏡。偏光顯微鏡產品優勢：錐光觀察更加清楚。1、優勢的散熱裝置，LED照明可選。2、無限遠光學系統，成像更加清晰。3、真正無應力物鏡，中心可調，保證實驗數據的精準性。4、微調格值
生物顯微鏡中物鏡
物鏡：在徠卡生物顯微鏡中物鏡是決定顯微鏡像的質量、分辨力和放大倍數的zui關鍵部件。一般由幾片不同球面半徑的凸凹透鏡按嚴格尺寸組臺而成，放大倍數愈高、矯正程度愈高的物鏡其構造愈復雜。在物鏡簡壁常注有主要性能指標——放大倍數、鏡口率、機械筒長（鏡簡長）和所要求蓋玻片的厚度。此外有的還標出矯正像差和色差
多光子顯微鏡成像技術：大視場多區域腦成像技術
為了了解神經回路的功能以及神經元之間的相互作用,需要對不同區域的大量神經元進行活體成像,我們這里介紹兩種顯微鏡技術,分別針對大視場多區域成像和自由活動小鼠的活體成像。從圖1可以看出用于視覺處理的神經元分布在直徑約3毫米的區域——小鼠初級視覺皮層和多個較高級的視覺區域。當前的商用雙光子顯微鏡系統通常提
顯微鏡中的黑馬奧林巴斯顯微鏡
奧林巴斯顯微鏡在中國市場一直占據著非常大的市場份額，這是因為在很大程度上奧林巴斯顯微鏡相對其他公司的顯微鏡更具有價格優勢。而且且奧林巴斯自有的無限遠光學系統在業界也是有一定的口碑除了價格優勢之外，奧林巴斯還有許多技術或性能上的優勢值得大家認可的。 1、奧林巴斯顯微鏡有出色的性價比，可以滿足
多光子共聚焦掃描顯微鏡的原理以及應用
多光子共聚焦顯微鏡是光學顯微鏡的重大改進，主要表現為可以觀察活細胞、固定細胞和組織的深層結構，并且可以得到清晰銳利的多層Z平面結構，即光學切片，并以此可以構建標本的三維實體結構。共聚焦顯微鏡采用激光光源，經過擴充后充滿整個物鏡后焦平面，然后經過物鏡的透鏡系統，在標本的焦平面上會聚成非常小的點。根據物
Thorlabs多光子顯微鏡基本套件及應用
MPM-2PKIT多光子基本套件是Thorlabs公司為想要自己搭建多光子成像系統的研究人員提供的解決方案，在量身定制的同時又不犧牲成像的性能。該套件包含一個模塊化多光子成像系統所必須的核心部件，為特定應用而配置。此外，該系統無需傳統顯微鏡，即可以對大樣品，如整個活體生物等進行成像，并且該設計減小了
關于多光子激發成像技術特點的概述
Periasamy 和 Skoglund 等比較了相同光學配置下，雙光子激光掃描顯微鏡和共聚焦掃描顯微鏡 [4]對非洲蟾蜍囊胚以及神經軸胚體細胞的成像能力。 研究結果表明，雙光子激發成像穿透深度大、受細胞的固有熒光影響小。 因而 ，雙光子提供了研究細胞內動力學、物質空間分布及結構的最佳方法。與熒
體視顯微鏡中透鏡的像差
體視顯微鏡中透鏡的像差前面我們討論的是理想成像的電子光學。在一些待定的條件下，物與像之間有點一點對應和幾何相似的關系。然而實際情況與理想的像有偏離，這就是傷差。我們可以根據它們不同的產生原因，用像點徑向位置的偏離來作定量描述。